發(fā)布時間：2019-06-02 00:02

【摘要】：研究背景和目的：現(xiàn)有的研究表明，，阿爾茨海默�。ˋD）患者腦內(nèi)淀粉樣蛋白Aβ）沉積增多，炎性反應(yīng)顯著升高，然而，迄今為止，對于不同病理形式的AβAD腦內(nèi)炎性反應(yīng)之間的關(guān)系以及AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)與認(rèn)知功能損害之間的關(guān)系缺乏深入研究。本項研究在前期試驗的基礎(chǔ)上，深入探討不同病理形式的Aβ與D腦內(nèi)炎性反應(yīng)之間的關(guān)系，以及AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)與認(rèn)知功能損害之間的關(guān)系，AD的防治提供新的思路。 研究方法：以3.5月齡、6月齡和12月齡APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠及年齡相匹配的野生型（WT）C57BL/6小鼠為研究對象，通過Morris水迷宮實驗檢各組實驗動物獲得性空間學(xué)習(xí)能力和空間記憶能力，通過免疫組織化學(xué)和熒光染方法檢測各組實驗動物腦組織中Aβ淀粉樣斑塊、活化星形膠質(zhì)細(xì)胞和活化小膠質(zhì)胞的數(shù)量變化情況，通過ELISA方法檢測各組實驗動物腦組織中可溶性Aβ、不可性Aβ及炎性反應(yīng)介質(zhì)IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2的表達(dá)變化情況。進(jìn)而使用相關(guān)性分析方法，探討不同病理形式的Aβ（總的Aβ斑塊、纖維性Aβ斑塊、可溶性Aβ和不可溶性Aβ）與AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)之間的關(guān)系，以及AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)與認(rèn)知功能損害之間的關(guān)系。 研究結(jié)果：（1）Morris水迷宮實驗表明，3.5月齡APPswe/PS1dE9小鼠與對照組WT小鼠相比，在獲得性訓(xùn)練階段潛伏逃逸時間沒有顯著差異，6月齡和12月齡APPswe/PS1dE9小鼠與相對照的WT小鼠相比，潛伏逃逸期均顯著延長。（2）免疫組織化學(xué)和熒光染色表明，3.5月齡組APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)沒有Aβ淀粉樣斑塊沉積，12月齡APPswe/PS1dE9小鼠與6月齡相比，總的Aβ斑塊和纖維性Aβ斑塊沉積均顯著增加。進(jìn)一步的ELISA實驗顯示，不同年齡組APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)可溶性Aβ含量具有顯著的組間差異，3.5月齡APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)沒有檢測到不可溶性Aβ，而12月齡APPswe/PS1dE9小鼠與6月齡相比，腦內(nèi)不可溶性Aβ含量顯著增加。（3）免疫組織化學(xué)染色表明，與對照組WT小鼠相比，3.5月齡組的APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)活化星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量沒有顯著差異，6月齡組和12月齡組的APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)活化星形膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量顯著增加；不同年齡組APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)活化星形膠質(zhì)細(xì)胞和活化小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量具有顯著的組間差異。進(jìn)一步的ELISA實驗顯示，與對照組WT小鼠相比，不同年齡組APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2含量均顯著增加；不同年齡組APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2具有顯著的組間差異。（4）不同病理形式的Aβ（總的Aβ斑塊、纖維性Aβ斑塊、可溶性Aβ和不可溶性Aβ）與AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)的相關(guān)性分析顯示，不同月齡APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)可溶性Aβ水平與活化膠質(zhì)細(xì)胞、IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2含量均呈顯著相關(guān)，而在早期和晚期斑塊階段，總的Aβ斑塊、纖維性Aβ斑塊和不可溶性Aβ含量與炎性反應(yīng)指標(biāo)均無顯著相關(guān)性。（5）炎性反應(yīng)與認(rèn)知功能損害之間相關(guān)性分析顯示，3.5月齡APPswe/PS1dE9小鼠空間記憶能力與活化的小膠質(zhì)細(xì)胞、IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2的水平呈顯著負(fù)相關(guān)；6月齡和12月齡APPswe/PS1dE9小鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力與活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞、活化的小膠質(zhì)細(xì)胞、IL-1β、IL-6、TNFα和PGE2的水平呈顯著負(fù)相關(guān)。 研究結(jié)論：（1）APPswe/PS1dE9小鼠腦組織中炎性反應(yīng)增強(qiáng)可能早在前體斑塊階段已經(jīng)發(fā)生，在早期和晚期斑塊階段顯著增加。（2）APPswe/PS1dE9小鼠腦組織中多種炎性標(biāo)志物與可溶性Aβ的水平顯著相關(guān)，而與Aβ淀粉樣斑塊或不可溶性Aβ無關(guān)。（3）APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)多種炎性標(biāo)志物與其空間學(xué)習(xí)和記憶能力顯著相關(guān)。上述研究結(jié)果表明，可溶性Aβ可能是導(dǎo)致AD腦內(nèi)炎性反應(yīng)的主要因素，而腦內(nèi)多種炎性途徑可能進(jìn)一步促進(jìn)AD認(rèn)知功能損害的發(fā)生和發(fā)展，提示針對多種炎癥反應(yīng)途徑的抗炎治療可能為AD的防治提供新的思路。
[Abstract]:Background and purpose of the study: The existing studies have shown that the deposition of amyloid A-like protein in the brain of the patients with Alzheimer's disease (AD) has increased and the inflammatory response is significantly increased, however, to date, The relationship between the inflammatory response of A-AD in different pathological forms and the relationship between the inflammatory response of AD and the impairment of cognitive function are not in-depth study. The relationship between A-type and D-brain inflammatory reaction in different pathological forms, as well as the relationship between the response of AD and the impairment of cognitive function, and the prevention and treatment of AD were discussed in this study. Methods: The acquired space learning ability and spatial memory of the experimental animals were tested by Morris water maze test in the study of the three-transgenic AD mice and the age-matched wild-type (WT) C57BL/6 mice at the age of 3.5 months,6 months and 12 months of age. The changes of A-type starch-like plaque, activated astrocytes and activated microglia in the brain of each group were detected by immunohistochemistry and fluorescence staining. The soluble A in the brain of each group of experimental animals was detected by ELISA. Expression of IL-1, IL-6, TNF-and PGE _ 2 in A-and inflammatory-response media In this paper, the relationship between A-type (total A-plaque, fibrous A-plaque, soluble A-and non-soluble A-type) and AD-brain inflammatory reaction in different pathological forms, as well as the correlation between the inflammatory reaction of AD and the impairment of cognitive function were discussed using the correlation analysis method. The results of the study were as follows: (1) The Morris water maze test showed that the latent escape time of APPswe/ PS1dE9 mice at the age of 3.5 months was not significantly different from that of the control group WT mice, and the latent escape period in the 6-and 12-month-old APPswe/ PS1dE9 mice were significantly different from those of the corresponding WT mice. The results showed that APPswe/ PS1dE9 mice in the 3.5-month-old group did not have A-type amyloid plaque deposit in the brain of the 3.5-month-old group. There was no significant difference in the content of soluble A in the brain of APPswe/ PS1dE9 in the age group, and no soluble A content was detected in the brain of APPswe/ PS1dE9 in the 3-month-old age group, while the content of soluble A-A in the brain of APPswe/ PS1dE9 in the 12-month-old group was significantly higher than that of the 6-month-old. There was no significant difference in the number of activated astrocytes in the brain of APPswe/ PS1dE9 mice in the 3.5-month-old group compared with the control group WT mice, and the number of activated astrocytes in the brain of the APPswe/ PS1dE9 mice in the 6-month-old group and the 12-month-old group was significantly higher than that of the control group WT mice. Increased number of activated astrocytes and activated microglia in the brain of APPswe/ PS1dE9 mice in different age groups The results showed that the levels of IL-1, IL-6, TNF, and PGE2 in the brain of the mice were significantly higher than those of the control group, and the levels of IL-1, IL-6, TNF and PGE2 in the brains of the mice were significantly higher than those in the control group. The correlation between the levels of soluble A in the brain of APPswe/ PS1dE9 mice and the activation of glial cells, IL-1, I, and I in the brain of APPswe/ PS1dE9 in different months of age showed that the level of soluble A-antigen in the brain of APPswe/ PS1dE9 in different months was the same as that of the activated glial cells. The levels of L-6, TNF and PGE2 were significantly correlated, while in the early and late stage of the plaque, the total A-A plaque, the fibrous A-plaque and the non-soluble A-A content and the inflammatory response index were not significant. The correlation between (5) inflammatory response and cognitive impairment showed that the spatial memory capacity of the 3.5-month-old APPswe/ PS1dE9 mice was significantly higher than that of activated microglia, IL-1, IL-6, TNF-and PGE2. The spatial learning and memory capacity of APPswe/ PS1dE9 in 6-and 12-month-old mice were significantly correlated with the activated astrocytes, activated microglia, IL-1, IL-6, TNF-and PGE2 levels. Conclusion: (1) The enhancement of inflammatory response in the brain of APPswe/ PS1dE9 mice may have occurred earlier in the stage of the precursor plaque, in the early and late stage of plaque formation. (2) The levels of multiple inflammatory markers in the brain tissue of the APPswe/ PS1dE9 mice were significantly correlated with the level of soluble A-type, and were similar to that of the A-type amyloid plaques or insolubles. (3) Multiple inflammatory markers in the brain of APPswe/ PS1dE9 mice and their spatial learning and memory The results of the above-mentioned study show that the soluble A-factor may be a major factor in the response of AD to the internal inflammatory response, while a wide range of inflammatory pathways in the brain may further contribute to the impairment of the AD cognitive function. Occurrence and development, suggesting that anti-inflammatory therapy for multiple inflammatory response pathways may be the prevention and treatment of AD
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R749.16

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本文編號：2490676