發(fā)布時間：2019-02-22 17:55

【摘要】：目的： 通過觀察慢性不可預見性應激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)對大鼠體重、行為學、前額皮質(zhì)多巴胺D2受體的表達及下游信號通路的影響，探討CUMS誘發(fā)抑郁癥的可能機制。 方法： 20只SD大鼠，隨機分為2組：正常組、模型組。采用不同應激因子交替持續(xù)應激28d復制大鼠CUMS抑郁模型。分別于實驗第1、7、14、21、28天稱取各組大鼠的體重，實驗第28、21、14、7天體重減去實驗第1天體重為各組大鼠的體重增長值；通過測定大鼠糖水攝入量及懸尾不動時間來觀察大鼠行為學的變化；采用放射性免疫法測定大鼠血清和前額皮質(zhì)中cAMP水平的變化；采用免疫組化法測定大鼠前額皮質(zhì)內(nèi)DRD2、PKA、CREB的表達；采用Western Blot法測定大鼠前額皮質(zhì)內(nèi)DRD2、Gαs/Gαi、PKA、CREB/p-CREB的表達。 結(jié)果： 1. CUMS對大鼠體重及行為學的影響 (1)實驗第1天，兩組大鼠體重無差異；從實驗第14天開始，與正常組比較，模型組大鼠體重增長值顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 (2)實驗第1天，兩組大鼠的懸尾不動時間無統(tǒng)計學差異；實驗第28天，與正常組比較，模型組大鼠懸尾不動時間明顯增加，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 (3)實驗第1天，兩組大鼠糖水消耗無統(tǒng)計學差異；實驗第28天，與正常組比較，模型組大鼠糖水消耗減少，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 2. CUMS對大鼠前額皮質(zhì)DRD2的影響 模型組大鼠前額皮質(zhì)各斷面均可見到DRD2染色陽性細胞，多見于皮質(zhì)Ⅲ-Ⅴ層，陽性表達呈棕褐色，，主要存在于細胞漿和樹突中,胞核不染色。由圖像分析所得平均光密度值可知，與正常組比較，模型組顯著增加，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。Western Blot結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組DRD2受體表達顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 3. CUMS對大鼠血清和前額皮質(zhì)cAMP的影響 與正常組比較，模型組大鼠血清和前額皮質(zhì)cAMP水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 4. CUMS對大鼠前額皮質(zhì)PKA、t-CREB/p-CREB的影響 模型組大鼠前額皮質(zhì)各斷面均可見到PKA、CREB染色陽性細胞，多見于皮質(zhì)Ⅱ-Ⅵ層，陽性表達呈棕褐色，PKA陽性反應存在于細胞漿、樹突及胞核中；CREB陽性反應存在于樹突及胞核中。由圖像分析所得平均光密度值可知，與正常組比較，模型組PKA、CREB均顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。Western Blot結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組PKA、t-CREB/p-CREB表達顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 5. CUMS對大鼠前額皮質(zhì)Gai、Gas的影響 Western Blot結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組Gas表達顯著下降，Gai表達顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義(P㩳0.05)。 結(jié)論： 1. CUMS可以影響大鼠的行為學，如體重降低、糖水攝入量減少、懸尾不動時間延長。 2. CUMS導致DRD2受體的表達增加，Gαi、Gαs的活性及表達水平發(fā)生了改變，cAMP水平下降，PKA、CREB/p-CREB表達減少，提示CUMS可能通過該信號轉(zhuǎn)導通路誘發(fā)抑郁樣行為的產(chǎn)生，為臨床實踐提供一定的實驗室依據(jù)。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R749.4

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本文編號：2428463