發(fā)布時間：2018-11-15 08:45

【摘要】：研究背景:抑郁癥(depression),一種以情緒低落,興趣減退為主要癥狀的精神科常見臨床疾病,給患者帶來了極大的心理痛苦,也給社會帶來了沉重的經濟負擔。根據最新流行病學調查數據顯示,抑郁癥的發(fā)病率呈現出逐年上升的趨勢。目前學者對于抑郁癥的發(fā)病機制存在多種學說,但尚無統(tǒng)一定論,因此對抑郁癥的發(fā)病機制研究顯得尤為迫切。行使大腦功能的基本單元是神經元,然而近來研究表明星型膠質細胞(astrocyte)不僅限于對神經元的支持營養(yǎng)作用,自身也存在信號傳遞的功能。星型膠質細胞的數量和功能與神經精神疾病存在密不可分的關系。大量的科學研究表明星型膠質細胞與抑郁癥等多種認知功能障礙疾病具有相關性。骨鈣素(osteocalcin)作為一種成骨細胞釋放的內源性多肽,具有多種生物學功能,新近研究表明骨鈣素對神經系統(tǒng)具有潛在的生物學效應,在神經精神疾病領域發(fā)揮著一定的作用。本實驗通過研究不同濃度的骨鈣素對星型膠質細胞的周期調控作用,初步揭示骨鈣素參與神經精神疾病的機制。目的:本實驗通過研究不同濃度的骨鈣素對星型膠質細胞的周期蛋白調控作用及增殖能力的影響,初步揭示骨鈣素是如何參與調節(jié)星型膠質細胞的周期調控機制。方法:使用Hanks細胞培養(yǎng)方法進行c57乳鼠星型膠質細胞的原代培養(yǎng),并使用傳代培養(yǎng)法,傳三代獲得純化的星型膠質細胞。使用cck-8試劑盒進行細胞增殖實驗,實驗分為三組,與450nm波長,分別測得OD值,繪制細胞增殖曲線。使用流式細胞儀Annexin V-FITC雙染法流式細胞術(FCM)對細胞周期分布進行檢測[6]。Western Blot凝膠電泳免疫印跡蛋白半定量方法測定周期相關蛋白CyclinD2、CyclinD3、Cyclin E、CyclinB1的相對表達量,并使用Quatity One進行條帶分析。結果:30ng/ml的骨鈣素作用星型膠質細胞,明顯的觀察到增殖效應,與對照組比較,P㩳0.05。30ng/ml的骨鈣素作用星型膠質細胞,具有影響細胞周期分布的效應,且具有劑量依賴性與對照組比較,P㩳0.05。不同濃度的骨鈣素影響星型膠質細胞周期蛋白的表達,如周期蛋白Cyclin D2、D3、E、B1均有不同程度的表達量改變與對照組比較,P㩳0.05。
[Abstract]:Background: depression (depression), a common psychiatric clinical disease characterized by depression and decline in interest, has brought great psychological pain to patients and a heavy economic burden to the society. According to the latest epidemiological survey data, the incidence of depression has been increasing year by year. At present, there are many theories about the pathogenesis of depression, but there is no unified conclusion, so it is urgent to study the pathogenesis of depression. The basic unit of brain function is neurons. However, recent studies have shown that astrocyte (astrocyte) is not only limited to supporting the nutritional function of neurons, but also has the function of signal transduction. The number and function of astrocytes are closely related to neuropsychiatric diseases. A large number of scientific studies have shown that astrocytes are associated with many cognitive disorders such as depression. Osteocalcin (osteocalcin), as an endogenous peptide released by osteoblasts, has many biological functions. Recent studies have shown that osteocalcin has potential biological effects on nervous system and plays a certain role in neuropsychiatric diseases. In this study, we studied the effects of different concentrations of osteocalcin on the cycle of astrocytes, and revealed the mechanism of osteocalcin involved in neuropsychiatric diseases. Aim: to investigate the effects of different concentrations of osteocalcin on the cyclin regulation and proliferation of astrocytes, and to explore how osteocalcin is involved in the regulation of astrocyte cycle. Methods: the primary culture of c57 rat astrocytes was carried out by Hanks cell culture method, and the purified astrocytes were obtained by the method of subculture. The cck-8 kit was used to carry out the cell proliferation experiment. The experiment was divided into three groups. The OD value was measured with 450nm wavelength and the cell proliferation curve was plotted. The cell cycle distribution was detected by flow cytometry (FCM) with flow cytometry (Annexin V-FITC) double staining method. [6]. Western Blot gel electrophoresis was used to detect the relative expression of cyclin B1 by Western blot. Quatity One was used to analyze the bands. Results: compared with the control group, the effect of osteocalcin of 30ng/ml on astrocyte proliferation was obvious. Compared with the control group, osteocalcin of P?0.05.30ng/ml had an effect on the distribution of cell cycle. In a dose-dependent manner, compared with the control group, P0. 05. Different concentrations of osteocalcin affected the expression of cyclin in astrocytes. For example, the expression of cyclin Cyclin D _ 2, D _ 3, E _ (1) was different from that of the control group (P < 0.05).
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R749.4

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本文編號：2332803