本文選題：熱休克蛋白 + C.神經(jīng)干細(xì)胞��； 參考：《中國(guó)病理生理雜志》2016年02期

【摘要】：目的:應(yīng)用腺病毒為載體在體外過(guò)表達(dá)熱休克蛋白75(Hsp75),研究Hsp75蛋白過(guò)表達(dá)對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞在Aβ誘導(dǎo)神經(jīng)毒性中的作用,并初步探討其作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2,實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、Aβ處理組、腺病毒陰性感染組和腺病毒Hsp75過(guò)表達(dá)感染組。使用熒光顯微鏡觀察腺病毒的感染情況并進(jìn)行細(xì)胞免疫鑒定;倒置相差顯微鏡觀察各組神經(jīng)干細(xì)胞的形態(tài);MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;Western blot檢測(cè)Hsp75和活化型caspase-3蛋白水平。結(jié)果:熒光顯微鏡觀察和Western blot檢測(cè)表明腺病毒成功感染神經(jīng)干細(xì)胞并高效表達(dá)Hsp75蛋白。此外,腺病毒感染不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變及細(xì)胞分化,同時(shí)也不會(huì)影響細(xì)胞活力。與對(duì)照組比較,Aβ處理組及腺病毒陰性感染組細(xì)胞存活率顯著降低(P0.05),細(xì)胞凋亡率及活化型caspase-3蛋白水平顯著增高(P0.05);然而,Hsp75過(guò)表達(dá)能顯著提高神經(jīng)干細(xì)胞的存活率,減少細(xì)胞凋亡和降低活化型caspase-3蛋白水平(P0.05)。結(jié)論:Hsp75過(guò)表達(dá)對(duì)Aβ誘導(dǎo)損傷的C17.2細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用,其機(jī)制可能是與抑制caspase-3途徑依賴的細(xì)胞凋亡有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of overexpression of Hsp75 protein on neural stem cells induced by A 尾 -induced neurotoxicity in vitro using adenovirus as a vector to overexpression heat shock protein 75 (Hsp75), and to explore the mechanism of the overexpression of Hsp75 protein. Methods: C17.2mouse neural stem cells were cultured in vitro and divided into control group, adenovirus negative infection group and adenovirus Hsp75 overexpression group. The infection of adenovirus was observed by fluorescence microscope, and the cell viability was detected by MTT assay with inverted phase contrast microscope. Apoptosis rate was detected by flow cytometry and the levels of Hsp75 and activated caspase-3 protein were detected by Western blot. Results: fluorescence microscopy and Western blot analysis showed that adenovirus successfully infected neural stem cells and expressed Hsp75 protein. In addition, adenovirus infection does not cause cell morphological changes and cell differentiation, nor does it affect cell viability. Compared with the control group, the cell survival rate decreased significantly (P0.05), the apoptosis rate and the level of activated caspase-3 protein increased significantly in the A 尾 treated group and the adenovirus negative infection group (P0.05), but the overexpression of Hsp75 significantly increased the survival rate of neural stem cells. To reduce apoptosis and reduce the level of activated caspase-3 protein (P0.05). Conclusion the overexpression of 1: Hsp75 has a significant protective effect on A 尾 -induced C17.2 cells, and the mechanism may be related to the inhibition of apoptosis dependent on the caspase-3 pathway.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院藥劑科;廣東省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥事管理科;中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院肝膽外科;廣州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥劑科;南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院燒傷科;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2012010008199;No.S2013010015546)
【分類(lèi)號(hào)】：R749.16

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本文編號(hào)：2110542