發(fā)布時(shí)間：2018-05-17 10:35

  本文選題：慢性腦低灌注 + 丁苯酞　； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2012年博士論文

【摘要】：阿爾茨海默�。ˋlzheimer Disease, AD）至今發(fā)病機(jī)制仍不清楚。其中60歲以上AD者80％以上具有CAA。二者均有淀粉樣物質(zhì)Aβ的沉積。其中Aβ40沉積在血管壁。慢性低灌注、淀粉樣物質(zhì)的沉積、神經(jīng)血管單元的損傷都與AD的發(fā)病有著密切的關(guān)系。盡管如此，到目前為止，這三者之間的關(guān)系鮮有報(bào)導(dǎo)，所以本研究的第一個(gè)任務(wù)是利用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎創(chuàng)造慢性低灌注大鼠模型，探討慢性低灌注、淀粉樣物質(zhì)的沉積和神經(jīng)血管單元損傷三者之間的關(guān)系。 丁苯酞是從芹菜的菜籽中分離得到的主要藥效成分，在當(dāng)歸、川穹、茶穹等中藥和天然植物中均有發(fā)現(xiàn)，具有抗驚厥、解痙、平喘等多種藥效作用。丁苯酞對(duì)AD病的治療作用屢有報(bào)導(dǎo)，但是具體機(jī)制尚不清楚。本論文的第二個(gè)任務(wù)將研究丁苯酞對(duì)慢性低灌注與淀粉樣物質(zhì)的沉積和神經(jīng)血管單元損傷關(guān)系的影響來(lái)初步探討丁苯酞治療AD病的機(jī)制。 第一部分慢性低灌注和淀粉樣物質(zhì)關(guān)系的研究 目的： 研究丁苯酞處理對(duì)慢性低灌注后腦組織中APP，MMP-2和MMP-9表達(dá)量以及淀粉樣物質(zhì)沉積和認(rèn)知功能的影響。 方法： 雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血組和丁苯酞組，按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法處理后，采取Western blot法測(cè)定不同時(shí)間腦組織中APP，MMP-2和MMP-9的表達(dá)量，并監(jiān)測(cè)淀粉樣物質(zhì)、MMP-2和MMP-9在血管壁的沉積情況，進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠認(rèn)知功能。 結(jié)果： 1．Western blot分析表明：缺血2個(gè)月后大鼠皮層中APP，MMP-2的表達(dá)明顯升高，而MMP-9表達(dá)未見明顯變化；腦缺血后大鼠海馬中MMP-2，MMP-9的表達(dá)均未見顯著改變。丁苯酞處理30天和60天后，腦皮層中APP和MMP-2的表達(dá)量與腦缺血組相比有了顯著的下降，而MMP-9的表達(dá)量沒有變化；丁苯酞處理7，14，30，60天后，海馬中APP，MMP-2，MMP-9的表達(dá)量均沒有變化。 2．免疫組化結(jié)果表明：腦慢性低灌注3天后MMP-2和Aβ40在靜脈血管內(nèi)皮上有顯著沉積，14天后在動(dòng)脈血管內(nèi)皮上有顯著沉積； 3．Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：慢性低灌注后1月丁苯酞治療組記憶功能有所改善。 結(jié)論： 研究表明，MMP-9與Aβ的前體蛋白β-APP無(wú)明確的相關(guān)性，MMP-2可能參與了血腦屏障的破壞以及淀粉樣物質(zhì)的沉積。丁苯酞能干預(yù)淀粉樣物質(zhì)的沉積，延緩血管病變，改善慢性低灌注后的認(rèn)知功能。 第二部分慢性低灌注后影像學(xué)的變化研究 目的： 建立雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎動(dòng)物模型探討慢性低灌注后海馬影像學(xué)變化及其病理改變與認(rèn)知功能減退的關(guān)系。 方法： 雄性大鼠隨機(jī)分為缺血組和假手術(shù)組，采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久結(jié)扎方法制作慢性腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀２捎肕orris水迷宮檢測(cè)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能，并對(duì)低灌注大鼠進(jìn)行頭顱MRI掃描及海馬體積測(cè)量。尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)目變化。 結(jié)果： 1．與假手術(shù)組相比，缺血組大鼠記憶功能出現(xiàn)明顯障礙。 2．影像學(xué)結(jié)果表明：缺血組慢性低灌注后3個(gè)月開始出現(xiàn)海馬體積縮小，局部?jī)?nèi)嗅皮層萎縮，局部蛛網(wǎng)膜下腔增寬。 3．病理檢測(cè)結(jié)果表明：缺血1月時(shí)海馬CA1區(qū)即可見神經(jīng)元減少，形態(tài)欠規(guī)則，細(xì)胞皺縮。3月時(shí)神經(jīng)元損害更加明顯。 結(jié)論： 2VO后全腦血流下降，海馬及局部?jī)?nèi)嗅皮層長(zhǎng)期腦血流下降，海馬體積變小，神經(jīng)元缺失，影響了與記憶相關(guān)的突觸聯(lián)系通路，造成認(rèn)知功能減退，海馬的影像學(xué)改變相對(duì)滯后于病理改變。 第三部分慢性低灌注后神經(jīng)血管單元的變化研究 目的：用大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎方法制作模型，觀察慢性低灌注大鼠血腦屏障通透性改變，，電鏡觀察神經(jīng)血管單元的超微結(jié)構(gòu)的改變。 方法： 雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血組、丁苯酞組，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法測(cè)定腦組織伊文思藍(lán)含量以反映血腦屏障的完整性，并用電鏡觀察神經(jīng)血管單元的超微結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果： 1．腦組織伊文思藍(lán)含量測(cè)定結(jié)果表明：缺血組7d亞組大鼠腦組織伊文思藍(lán)含量高于假手術(shù)組及丁苯酞組。 2．伊文思藍(lán)染色及電鏡結(jié)果表明：缺血組7d亞組血腦屏障明顯受損，假手術(shù)組血腦屏障完整，丁苯酞組受損較�。浑S著時(shí)間的延長(zhǎng)，受損血腦屏障完全修復(fù)，與假手術(shù)組無(wú)差異。 結(jié)論： 慢性低灌注后有神經(jīng)元凋亡，血腦屏障遭到破壞，丁苯酞對(duì)血腦屏障有保護(hù)作用；隨著時(shí)間的進(jìn)行，血腦屏障可以完全修復(fù)。
[Abstract]:The pathogenesis of Alzheimer Disease (AD) is still unclear. More than 80% of the AD persons above 60 years old have the deposition of amyloid A beta in CAA. two. Among them, A beta 40 is deposited on the vascular wall. Chronic low perfusion, amyloid deposition, and neurovascular damage are closely related to the pathogenesis of AD. So far, there are few reports on the relationship between the three, so the first task of this study is to create a chronic low perfusion rat model with bilateral common carotid artery ligation to explore the relationship between chronic hypoperfusion, the deposition of amyloid material and the damage of the neurovascular unit (three).
Butylphthalide is the main effective component isolated from the rapeseed of celery. It has been found in Chinese medicine and natural plants of Chinese angelica, dome, tea dome and other natural plants. It has many effects on anticonvulsant, spasmodic and antiasthmatic effect. The therapeutic effect of butylphthalide on AD disease has been reported, but the specific mechanism is not clear. Second tasks in this paper will study butadiene The effect of phthalide on chronic hypoperfusion and amyloid deposition and nerve vascular unit injury was preliminarily explored to explore the mechanism of butylphthalide in the treatment of AD's disease.
Part one study on the relationship between chronic hypoperfusion and amyloid substance
Objective:
The effects of butylphthalide on APP, MMP-2 and MMP-9 expression, amyloid deposition and cognitive function in brain tissue after chronic hypoperfusion were studied.
Method錛

本文編號(hào)：1901043