本文選題：阿爾茨海默病 + 淀粉樣蛋白　； 參考：《承德醫(yī)學(xué)院》2013年碩士論文

【摘要】：阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）又稱老年性癡呆，是引起癡呆的重要疾病來(lái)源。隨著當(dāng)今世界人口及老齡化的加速，AD已成為全球性的重大公共健康問(wèn)題，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量，增加了社會(huì)和家庭的精神及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。作為老年人群癡呆的最主要疾病類型，阿爾茨海默病是以進(jìn)行性全面認(rèn)知功能障礙、行為損害為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，發(fā)病率逐年增長(zhǎng)，目前已成為嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病。就目前的進(jìn)展來(lái)看，有關(guān)防治的藥物研究主要還是延緩患者的死亡、部分阻止或延緩疾病的發(fā)作和改善患者的生活質(zhì)量，并提倡多因素、個(gè)性化治療。 丁苯酞（NBP）是我國(guó)成功研制的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的治療急性缺血性腦卒中的一類化學(xué)新藥，其化學(xué)名稱為消旋-3-正丁基苯酞，可通過(guò)血腦屏障而發(fā)揮作用，有研究表明此藥物有抑制自由基和提高抗氧化酶活性等藥效作用。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠雙側(cè)海馬內(nèi)注射淀粉樣蛋白（Aβ25-35）制備大鼠AD模型，從氧化應(yīng)激等機(jī)制觀察丁苯酞（NBP）對(duì)Aβ致大鼠學(xué)習(xí)、記憶能力損傷的影響及機(jī)制，以期為該藥用于AD的預(yù)防、治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的： 觀察NBP對(duì)大鼠雙側(cè)海馬注射Aβ致大鼠學(xué)習(xí)、記憶能力損傷的影響及抗氧化機(jī)制研究。 方法： 1實(shí)驗(yàn)分組及處理：雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、NBP低、高劑量組、VE組，每組8只，對(duì)照組、模型組灌胃蒸餾水，其它各組分別NBP灌胃（80mg/kg、120mg/kg）、VE（10mg/只），灌胃20天，在灌胃一周后對(duì)照組大鼠海馬注射生理鹽水，其它各組注射Aβ，注射Aβ一周后做Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，連續(xù)做6天后處死。另選2只大鼠注射Aβ3天后處死，腦組織外固定后30μm厚連續(xù)震蕩切片，觀察針道。 2模型制備：采用大鼠腦立體定位技術(shù)，于大鼠AP-3.5mm、ML±2mm、DV2.7mm定位海馬CA1區(qū)，注射凝膠態(tài)Aβ5μl含10μg。 3Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：于大鼠海馬注射Aβ一周后做水迷宮實(shí)驗(yàn)，每天2次，連續(xù)6天，記錄大鼠60秒內(nèi)尋找平臺(tái)的潛伏期，第6天測(cè)定大鼠尋找平臺(tái)潛伏期后撤去平臺(tái)，觀察大鼠2分鐘內(nèi)穿越平臺(tái)區(qū)域的次數(shù)，2分鐘內(nèi)在平臺(tái)區(qū)象限停留的時(shí)間，2分鐘內(nèi)大鼠在平臺(tái)區(qū)象限所游路程與總路程比值。 4標(biāo)本處理：每組取2只大鼠行多聚甲醛灌注進(jìn)行內(nèi)固定，取大鼠腦組織進(jìn)行外固定，石蠟包埋，做硫堇尼氏體染色。 5血清制備、血清、組織中生化指標(biāo)檢測(cè)：大鼠經(jīng)心臟取血，低溫離心，檢測(cè)血清中SOD、GSH-Px活力及MDA含量，取6只大鼠新鮮的海馬、皮層組織，檢測(cè)組織中SOD、GSH-Px活力及MDA含量。 6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果： 1大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對(duì)照組大鼠第3，4，5，6天尋找平臺(tái)的潛伏期分別為24.62，18.01，14.25，，10.30秒，模型組大鼠4天的潛伏期時(shí)間明顯比對(duì)照組長(zhǎng)。丁苯酞低、高劑量組及VE組較模型組時(shí)間明顯縮短。 對(duì)照組大鼠2分鐘內(nèi)穿越平臺(tái)次數(shù)為15.25次、在平臺(tái)象限停留時(shí)間為60.26秒、平臺(tái)象限路程與總路程比值為62.33%，模型組較對(duì)照組明顯減少；丁苯酞低、高劑量組及VE組與模型組相比明顯增加。 2光鏡下尼氏體染色顯示對(duì)照組大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元有3-4層，核染色深，細(xì)胞形態(tài)清晰、完整，可見(jiàn)神經(jīng)元的突起；模型組大鼠海馬CA1區(qū)有大段神經(jīng)元缺失，核染色淺，突起消失，大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯減少；丁苯酞低、高劑量組及VE組較模型組損傷減輕，細(xì)胞數(shù)較模型組明顯增多。 大鼠皮層尼氏體染色顯示對(duì)照組大鼠皮層細(xì)胞較多，神經(jīng)元形態(tài)清晰、完整，核仁清晰，尼氏體染色深、多，突起明顯，模型組大鼠皮層局部區(qū)域可見(jiàn)神經(jīng)元死亡，可見(jiàn)斷裂的突起和不完整的胞體，細(xì)胞數(shù)明顯少于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組及VE組較模型組損傷減輕，細(xì)胞數(shù)較模型組明顯增多。 3大鼠血清SOD、GSH-Px活力及MDA含量 對(duì)照組大鼠血清中SOD、GSH-Px分別為269.02，1907.03，模型組（215.63，790.54）明顯低于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組與模型組相比明顯升高。 對(duì)照組大鼠血清中MDA為8.73nmol/ml，模型組（16.21）明顯高于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組及VE組較模型組明顯降低，且丁苯酞低、高劑量組間存在明顯差異。 4大鼠海馬組織中SOD、GSH-Px活力及MDA含量 對(duì)照組大鼠海馬組織中SOD、GSH-Px分別為60.33，186.70，模型組（28.25，105.35）明顯低于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組及VE組SOD明顯高于模型組，丁苯酞高劑量組GSH-Px明顯高于模型組。 對(duì)照組大鼠海馬組織中MDA為6.82，模型組（12.13）明顯高于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組及VE組（9.09，7.53，9.29）明顯低于模型組。 5大鼠皮層組織中SOD、GSH-Px活力及MDA含量： 對(duì)照組大鼠皮層組織中SOD、GSH-Px分別為60.17，115.72，模型組（30.81，69.98）較對(duì)照組明顯降低；丁苯酞低、高劑量組及VE組SOD明顯高于模型組，丁苯酞高劑量組GSH-Px明顯高于模型組。 對(duì)照組大鼠皮層組織中MDA為7.28，模型組（12.92）明顯高于對(duì)照組；丁苯酞低、高劑量組及VE組（10.82，8.61，10.58）明顯低于模型組。 結(jié)論： 1雙側(cè)海馬注射Aβ引起海馬CA1區(qū)及皮層神經(jīng)元嚴(yán)重?fù)p傷，導(dǎo)致學(xué)習(xí)、記憶能力下降，丁苯酞低、高劑量及VE組能明顯改善大鼠海馬、皮層神經(jīng)元結(jié)構(gòu)，提高大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，對(duì)注射Aβ引起的損傷有一定拮抗作用，且丁苯酞的作用具有劑量依賴性。 2大鼠海馬注射Aβ可明顯降低血清中SOD、GSH-Px的活力，降低大鼠海馬、皮層組織中SOD、GSH-Px的活力，導(dǎo)致血清、海馬及皮層中抗氧化能力降低，氧化產(chǎn)物增多，引起大鼠海馬及皮層神經(jīng)元損傷。丁苯酞可明顯減輕Aβ引起的大鼠血清、海馬及皮層中抗氧化酶活力降低，減少氧化產(chǎn)物合成，減輕神經(jīng)元損傷，具有神經(jīng)元保護(hù)作用，且有一定的劑量依賴性。
[Abstract]:Alzheimer 's disease (AD), also known as Alzheimer's disease, is an important disease source of dementia. With the acceleration of population and aging in the world, AD has become a major public health problem in the world. It seriously affects the quality of life of the patients and increases the mental and economic burden of the society and family. As an elderly population, it is an elderly population. The main disease type of dementia, Alzheimer's disease is a central nervous system degenerative disease characterized by progressive comprehensive cognitive impairment and behavioral impairment. The incidence of Alzheimer's disease is increasing year by year. At present, it has become a major disease that seriously threatens human health. The death of patients partially prevents or delays the onset of disease and improves the quality of life of patients, and advocates multiple factors and individualized treatment.
Ding Bentai (NBP) is a new kind of chemical new drug that has been developed successfully in China for the treatment of acute ischemic stroke with independent intellectual property rights. Its chemical name is racemic -3- n-butyl phthalide, which can play a role through the blood brain barrier. Some studies have shown that the drug has the effect of inhibiting free radical and raising antioxidant enzyme activity. This experiment is used in this experiment. The rat AD model was prepared by injection of amyloid protein (A beta 25-35) in the rat hippocampus. The effect and mechanism of NBP on the learning of A beta induced rats and the impairment of memory ability were observed in order to provide the experimental basis for the prevention of AD.
Objective:
To observe the effects of NBP on learning and memory impairment induced by A beta in bilateral hippocampus, and to study the antioxidant mechanism.
Method錛

本文編號(hào)：1828081