發(fā)布時(shí)間：2018-03-05 08:57

  本文選題：褪黑素　切入點(diǎn)：母嬰分離　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分母嬰分離對小鼠青年期HPA軸和神經(jīng)發(fā)生的影響目的:探討新生期母嬰分離(maternal separation,MS)對小鼠青年期HPA軸和神經(jīng)發(fā)生的影響。方法:12只懷孕昆明小鼠隨機(jī)分為母嬰分離組(即MS組)和對照組。其中MS組又分為7 d、14 d、21 d三個(gè)亞組(7 d組在P1~P7期間新生鼠與母鼠每天分離3 h,依次類推);對照組新生鼠出生后與母鼠同籠喂養(yǎng)不做任何處理。所有仔鼠于P23斷乳,雌雄分籠,雄性小鼠按照每籠5~7只原則喂養(yǎng)至P42處死取腦,常規(guī)石蠟包埋。用免疫組織化學(xué)染色法和Image J圖像分析技術(shù)檢測各組海馬和前額葉皮質(zhì)區(qū)糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor,GR)和微管相關(guān)蛋白(doublecortin,DCX)的表達(dá)和分布。結(jié)果:GR免疫陽性產(chǎn)物呈棕褐色顆粒狀均勻分布于胞漿和胞核,在海馬陽性細(xì)胞呈帶狀排列;在前額葉皮質(zhì)區(qū),GR免疫陽性細(xì)胞分布廣泛。GR陽性細(xì)胞在各組小鼠海馬和前額葉皮質(zhì)均有不同程度的表達(dá)。與對照組相比,MS組從7 d組開始海馬和前額葉皮質(zhì)區(qū)內(nèi)GR免疫陽性細(xì)胞表達(dá)開始減弱,密度下調(diào),并隨著分離重復(fù)時(shí)間的延長,呈顯著遞減趨勢。MS各組小鼠平均光密度值均明顯低于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);MS組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。DCX陽性產(chǎn)物表達(dá)于細(xì)胞的胞漿和突起內(nèi),呈棕色,DCX陽性細(xì)胞胞體呈梭形,單個(gè)前導(dǎo)突起,大部分突起朝向并深入分子層。各組DCX陽性細(xì)胞在小鼠海馬齒狀回顆粒下層都有不同程度的表達(dá),在前額葉皮質(zhì)區(qū)未見表達(dá)。與對照組相比,MS組從7d組開始陽性細(xì)胞開始明顯減少,并隨著分離重復(fù)時(shí)間的延長,陽性細(xì)胞數(shù)呈遞減趨勢;MS各組平均光密度值均低于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);MS組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。結(jié)論:MS使小鼠青年期海馬和前額葉皮質(zhì)GR表達(dá)減少、減弱,海馬齒狀回顆粒下層神經(jīng)發(fā)生減少,且隨著分離重復(fù)時(shí)間的延長,呈遞減趨勢�？梢娊�(jīng)歷MS早期不良生活事件的小鼠青年期海馬和前額葉皮質(zhì)GR表達(dá)下調(diào),HPA軸對應(yīng)激的反應(yīng)性增高,抑制神經(jīng)發(fā)生,分離時(shí)間越長對HPA軸和神經(jīng)發(fā)生影響越大。第二部分褪黑素對母嬰分離小鼠青年期HPA軸和神經(jīng)發(fā)生的影響目的:探討褪黑素(Melatonin,MT)對新生期母嬰分離(maternal separation,MS)小鼠青年期HPA軸和神經(jīng)發(fā)生的調(diào)節(jié)作用。方法:9只懷孕昆明小鼠隨機(jī)分為母嬰分離+褪黑素干預(yù)組(即MS+MT組)、母嬰分離+生理鹽水組(即MS+NS組)和對照組。MS+MT組和MS+NS組在P1~P21期間新生鼠與母鼠每天分離3 h;MS+MT組新生鼠于P7起每日17:00連續(xù)腹腔注射MT(10ml·kg-1·d-1)14 d;MS+NS組于P7起每日17:00連續(xù)腹腔注射生理鹽水(10ml·kg-1·d-1)14 d;對照組新生鼠出生后與母鼠同籠喂養(yǎng)不做任何處理。所有仔鼠于P23斷乳,雌雄分籠,雄性小鼠按照每籠5~7只原則喂養(yǎng)至P42處死取腦,常規(guī)石蠟包埋。用免疫組織化學(xué)染色法和Image J圖像分析技術(shù)檢測各組海馬和前額葉皮質(zhì)區(qū)GR和DCX的表達(dá)和分布。結(jié)果:GR免疫陽性產(chǎn)物呈棕褐色顆粒狀均勻分布于胞漿和胞核,在海馬陽性細(xì)胞呈帶狀排列;在前額葉皮質(zhì)區(qū),GR免疫陽性細(xì)胞分布廣泛。GR陽性細(xì)胞在各組小鼠海馬和前額葉皮質(zhì)均有不同程度的表達(dá)。MS+NS組海馬和前額葉皮質(zhì)區(qū)內(nèi)GR免疫陽性產(chǎn)物主要位于胞漿且表達(dá)減弱,其平均光密度值明顯低于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。經(jīng)MT干預(yù)后,海馬和前額葉皮質(zhì)區(qū)內(nèi)GR表達(dá)增強(qiáng)、密度增高,與MS+NS組和對照組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。DCX陽性產(chǎn)物表達(dá)于細(xì)胞的胞漿和突起內(nèi),呈棕色,DCX陽性細(xì)胞胞體呈梭形,單個(gè)前導(dǎo)突起,大部分突起朝向并深入分子層。各組DCX陽性細(xì)胞在小鼠海馬齒狀回顆粒下層都有不同程度的表達(dá),在前額葉皮質(zhì)區(qū)未見表達(dá)。與對照組相比,MS+NS組海馬齒狀回DCX免疫陽性細(xì)胞數(shù)明顯降低,其平均光密度值明顯低于對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。經(jīng)MT干預(yù)后,海馬齒狀回DCX陽性表達(dá)明顯升高,與MS+NS組和對照組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。結(jié)論:MT使海馬和前額葉皮質(zhì)GR表達(dá)顯著增加,神經(jīng)發(fā)生增加�？梢奙T參與了機(jī)體應(yīng)激反應(yīng),抑制HPA軸活性,提高了MS小鼠青年期海馬神經(jīng)發(fā)生水平。MT可以逆轉(zhuǎn)MS早期不良生活經(jīng)歷對小鼠大腦發(fā)育過程中的永久性損傷。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R749

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1569574