胰淀素在正常和癡呆小鼠腦內(nèi)的分布和表達變化
本文關(guān)鍵詞: 胰淀素 老年斑 β-淀粉樣蛋白 阿爾茨海默病 出處:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:系統(tǒng)研究胰淀素在正常和阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)癡呆模型小鼠腦內(nèi)的分布和表達情況,以及與老年斑的關(guān)系,以弄清胰淀素是否參與AD的發(fā)病。方法:取5月、9月、12月及以上雄性APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠(2×TgAD)和野生型小鼠(WT),每組5只,采用免疫熒光染色結(jié)合激光共聚焦技術(shù)檢測胰淀素在小鼠腦內(nèi)的分布和表達情況,胰淀素與GFAP、NeuN、老年斑的關(guān)系;通過RT-PCR和Western blot(WB)方法檢測胰淀素核酸蛋白水平的變化。結(jié)果:免疫熒光染色結(jié)果顯示:胰淀素主要表達于神經(jīng)元;胰淀素陽性神經(jīng)元廣泛分布于小鼠腦內(nèi),但具有區(qū)域差異性,強表達于皮質(zhì)區(qū)域,尤其是在顆粒細胞層和錐體細胞層,中等表達于海馬各亞區(qū),弱表達于丘腦;在2×TgAD皮質(zhì)區(qū)域胰淀素免疫陽性神經(jīng)元的數(shù)量明顯高于WT,而在海馬區(qū)域則無明顯差異;隨著年齡的增加,胰淀素陽性神經(jīng)元的數(shù)量明顯增多。免疫熒光雙標結(jié)果顯示:隨著年齡的增加,胰淀素在2xTgAD小鼠腦內(nèi)能夠聚集形成一些斑塊狀結(jié)構(gòu);老年斑的數(shù)量逐漸增多;胰淀素和老年斑存在共表達現(xiàn)象。WB顯示:胰淀素蛋白在AD小鼠腦內(nèi)的表達水平高于WT小鼠,且隨著年齡的增加,其表達水平逐漸上升。RT-PCR顯示:AD小鼠腦內(nèi)胰淀素mRNA的表達高于WT。結(jié)論:胰淀素在不同年齡段正常和AD模型小鼠腦內(nèi)的分布和表達存在明顯差異,這些差異可能與老年斑的形成和AD疾病的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)。
[Abstract]:Objective: to study the distribution and expression of amylin in brain of normal and Alzheimer's disease mice. And the relationship with senile plaque to find out whether amylin is involved in AD. Methods: May, September. In December and above, male APP/PS1 double transgenic mice (2 脳 TgAD) and wild type mice (5 mice in each group) were divided into two groups. The distribution and expression of amylin in mouse brain were detected by immunofluorescence staining and laser confocal technique. The level of amylin nucleic acid protein was detected by RT-PCR and Western blotDNA. Results: the results of immunofluorescence staining showed that amylin was mainly expressed in neurons. Amylin positive neurons were widely distributed in the mouse brain, but had regional differences. They were strongly expressed in the cortex, especially in the granular cell layer and pyramidal cell layer, moderately expressed in the hippocampal subareas and weakly expressed in the thalamus. The number of amylin immunoreactive neurons in the cortex of 2 脳 TgAD was significantly higher than that in WT.There was no significant difference in hippocampal area. With the increase of age, the number of amylin positive neurons increased obviously. The results of double immunofluorescence showed that the number of amylin positive neurons increased with age. Amylin could gather in the brain of 2xTgAD mice to form some plaques. The number of senile plaques increased gradually; The co-expression of amylin and senile plaque. WB showed that the expression level of amylin protein in brain of AD mice was higher than that of WT mice, and it increased with age. RT-PCR showed that the expression of amylin mRNA in brain was higher than that of WT.Conclusion:. There were significant differences in the distribution and expression of amylin in the brains of normal and AD mice at different ages. These differences may be related to the formation of senile plaque and the occurrence and development of AD disease.
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R749.16
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