本文關鍵詞：阿爾茲海默癥小鼠病理特征全腦分布特性的初步研究

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【摘要】：阿爾茲海默癥(Alzheimer's disease,AD)是一種與衰老有關,并以認知功能減退為特征的神經(jīng)退行性疾病。其主要病理變化為腦內出現(xiàn)老年斑(Senile Plaques,SPs)和神經(jīng)纖維纏結(Neurofibrillary Tangles,NFTs),并伴隨有神經(jīng)元數(shù)目的減少。AD的病理改變隨著病程發(fā)展表現(xiàn)出漸進性的發(fā)育變化,且在不同的腦區(qū)和核團表征差異較大。AD患者在學習與記憶相關的神經(jīng)環(huán)路上,具有異常的結構和功能連接特點,由于學習、記憶等神經(jīng)高級功能需要多個腦區(qū)的協(xié)同作用,在AD疾病模型中從全腦的角度定量分析腦內的病理變化,將有助于探明AD發(fā)病機制以及AD的防治和藥物開發(fā)。本文優(yōu)化了針對全腦樣本的連續(xù)冰凍切片技術,并構建了AD小鼠病理特征全腦分布數(shù)據(jù)集,在此基礎上,分析了學習與記憶相關的部分腦區(qū)內SPs隨病程的發(fā)育變化。本文在分析了現(xiàn)有AD病理研究技術手段的基礎上,選擇了切片和染色相結合的方式。針對APPswe/PS1d E9雙轉基因和APPswe/PS1M146V/tau P301L三轉基因AD小鼠模型,本文對比了銀浸染方法,熒光染料組織化學方法和免疫組化染色方法,結果顯示免疫組化染色方法特異性強,能有效全面的檢測抗原顯示病理特征,通過優(yōu)化改進實驗條件確定了一套穩(wěn)定完善的批量切片免疫組化染色流程。同時,設計了可校正腦組織切削方位的包埋底座,結合梯度蔗糖脫水和液氮快速冷凍的方法,優(yōu)化改進了一套針對全腦樣本的連續(xù)冰凍切片方法,能有效減少冰晶的形成,并且能保證切片連續(xù)、對稱且完整,易于數(shù)據(jù)分析和對比。本文將優(yōu)化的染色流程應用至AD小鼠模型的全腦樣本,一只小鼠全腦獲取約600張25μm的連續(xù)切片。利用相鄰切片分別進行免疫組化染色標記SPs或NFTs,并以尼氏染色作為細胞構筑參考,本文獲取了6套6,9,12月齡的APPswe/PS1d E9雄性小鼠的病理特征全腦分布數(shù)據(jù)集�；谶@些數(shù)據(jù)集,本文初步探究了學習與記憶相關的部分腦區(qū)內SPs隨病程的發(fā)育變化。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R749.16

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本文編號：1282068