本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激上調(diào)小鼠生物鐘黑視蛋白基因表達

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【摘要】：目的：內(nèi)在光敏感的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Intrinsically photosensitive retinal ganglion cells, ipRGCs)在晝夜節(jié)律和睡眠調(diào)節(jié)上有重要作用,而且最近研究發(fā)現(xiàn)ipRGCs可能參與調(diào)控情緒和認(rèn)知功能。黑視蛋白(melanopsin)為ipRGCs表達的重要膜蛋白,參與調(diào)控晝夜節(jié)律。為了探討晝夜節(jié)律紊亂在抑郁癥發(fā)病中的潛在作用,我們以生物鐘基因melanopsin為基本出發(fā)點,研究了黑視蛋白在抑郁癥模型中的表達改變,,旨在進一步研究抑郁發(fā)生的可能機制,為抑郁癥的治療提供新思路方法：將健康成年c57小鼠40只隨機分成實驗組和對照組,,每組20只,應(yīng)用慢性束縛應(yīng)激法建立小鼠應(yīng)激抑郁模型,對照組不予任何處理,3周后用糖水消耗實驗、強迫游泳實驗確認(rèn)小鼠抑郁樣行為表型,然后應(yīng)用Western blot和免疫熒光化學(xué)技術(shù)檢測黑視蛋白的變化。隨后應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)體外培養(yǎng)視網(wǎng)膜細(xì)胞,氫化可的松1μ m慢性處理七天,western blot檢測黑視蛋白表達改變,以進一步驗證黑視蛋白與應(yīng)激所致抑郁癥的相關(guān)性。結(jié)果：經(jīng)21天的慢性束縛應(yīng)激后,糖水消耗實驗和強迫游泳結(jié)果表明我們的抑郁模型是成功的。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示黑視蛋白分布在一小部分RGCs胞體的細(xì)胞膜、樹突和軸突,樹突和軸突的陽性染色呈串珠狀,樹突的分支相互吻合,形成完整的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。western blot結(jié)果顯示,與對照組相比,在體慢性束縛應(yīng)激和離體糖皮質(zhì)激素慢性處理培養(yǎng)的視網(wǎng)膜細(xì)胞均上調(diào)黑視蛋白的表達(p0.05)。結(jié)論：在體慢性束縛應(yīng)激和離體糖皮質(zhì)激素慢性處理培養(yǎng)的視網(wǎng)膜細(xì)胞均上調(diào)黑視蛋白的表達,說明CRS引發(fā)的上述改變可能與內(nèi)源性皮質(zhì)醇升高有關(guān),提示下調(diào)該生物鐘基因的表達可能具有治療學(xué)意義。
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R749.4

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本文編號：1252870