發(fā)布時(shí)間：2017-10-29 07:05

  本文關(guān)鍵詞：氧化異阿樸菲—硫辛酸雙分子雜合體抗AD作用及機(jī)制研究

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【摘要】：隨著人類平均壽命的逐年增加，全世界范圍內(nèi)的阿爾茨海默病發(fā)病率顯著升高，已嚴(yán)重威脅老年人的身體健康。阿爾茨海默病普遍認(rèn)同的發(fā)病機(jī)制包括膽堿能假說、β-淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)假說和氧化應(yīng)激假說。而目前認(rèn)為抗膽堿酯酶抑制劑是最有效治療藥物，其主要作用靶點(diǎn)為乙酰膽堿酯酶的活性位點(diǎn)。近年來，隨著乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)及其促進(jìn)淀粉樣蛋白沉積作用被揭示，尋找或合成針對(duì)乙酰膽堿酯酶雙位點(diǎn)抑制劑以及偶聯(lián)抗氧化基團(tuán)的多位點(diǎn)抑制劑成為抗阿爾茨海默病藥物研究熱點(diǎn)。 本課題組前期體外試驗(yàn)證實(shí)蝙蝠葛提取物氧化異阿樸菲類生物堿及其化學(xué)修飾衍生物具有良好的抗阿爾茨海默病作用，主要作用位點(diǎn)為乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點(diǎn)，本研究利用化學(xué)合成氧化異阿樸菲-9-位修飾物與硫辛酸雙分子雜合體，，通過體外、體內(nèi)試驗(yàn)，探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機(jī)制,為后期的新藥開發(fā)提供初步試驗(yàn)依據(jù)。 目的：探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機(jī)制,為后期的新藥開發(fā)提供初步試驗(yàn)依據(jù)。方法：（1）體外試驗(yàn)：a.購買商品化的AChE、BuChE,利用改良Ellman法檢測(cè)氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子抗膽堿酯酶活性；b.利用培養(yǎng)的細(xì)胞，MTT法檢測(cè)氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體細(xì)胞毒性及對(duì)H2O2損傷的保護(hù)作用。（2）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅模型，設(shè)立對(duì)照組、溶劑對(duì)照組、模型組、不同濃度梯度的給藥組，觀察以下指標(biāo)：（1）果蠅生存率、攀爬能力；（2）檢測(cè)果蠅腦組織SOD、MDA水平，衡量果蠅腦組織氧化應(yīng)激水平；（3）檢測(cè)果蠅腦組織ATP含量，衡量果蠅腦組織線粒體損傷水平；（4）果蠅腦組織切片HE染色，比較病理損傷程度。收集數(shù)據(jù)，作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果與結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)化合物8-11，細(xì)胞毒性低，體外都具有不同程度地抗AChE活性，其中以化合物8、9為甚�；衔�8-11作用于Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅，顯著降低果蠅腦組織氧化應(yīng)激水平，減輕線粒體損傷，抑制腦組織膽堿酯酶活性，腦組織病理損傷不同程度地改善。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 氧化異阿樸菲-硫辛酸雙分子雜合體 膽堿酯酶抑制劑 氧化應(yīng)激 線粒體損傷
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英漢縮略詞對(duì)照表10-11
• 前言11-16
• 1 材料與方法16-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料16-19
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16-17
• 1.1.2 果蠅普通玉米培養(yǎng)基的配制17-18
• 1.1.3 果蠅的培養(yǎng)18
• 1.1.4 果蠅的麻醉18
• 1.1.5 處女蠅的收集18
• 1.1.6 果蠅雜交18-19
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑19-21
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器21-23
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法23-29
• 1.4.1 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙雜合體合成路線23-24
• 1.4.2 AChE 和 BChE 活性檢測(cè)24-25
• 1.4.3 SH-SY5Y 細(xì)胞培養(yǎng) ,MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性25
• 1.4.4 驗(yàn)證模型是否成功25-29
• 1.5 研究氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Elav-GAL4/UAS 系統(tǒng) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅模型神經(jīng)變性是否具有作用29
• 1.5.1 果蠅生存實(shí)驗(yàn)29
• 1.5.2 果蠅爬行能力29
• 1.6 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅模型的作用機(jī)制29-31
• 1.6.1 果蠅腦組織 SOD 活性和 MDA 含量測(cè)定29
• 1.6.2 果蠅腦組織 ATP 含量測(cè)定29-30
• 1.6.3 果蠅腦組織 CHE 含量測(cè)定30
• 1.6.4 果蠅腦部組織病理切片 HE 染色觀察30-31
• 1.7 統(tǒng)計(jì)方法31-32
• 2 結(jié)果32-42
• 2.1 體外實(shí)驗(yàn)32-34
• 2.1.1 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體抑制 AChE 和 BuChE 的活性32-33
• 2.1.2 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體細(xì)胞毒性及對(duì) H2O2損傷的SH-SY5Y 細(xì)胞的保護(hù)作用33-34
• 2.2 Elav-GAL4/UAS 系統(tǒng) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅34-42
• 2.2.1 模型組 Aβ42 mRNA 表達(dá)34-35
• 2.2.2 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅爬行能力的影響35-37
• 2.2.3 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅壽命的影響37-38
• 2.2.4 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅腦組織 SOD和 MDA 活性的影響38-39
• 2.2.5 氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體對(duì) Aβ42 轉(zhuǎn)基因果蠅腦組織 ATP含量及 AChE 活性的影響39-41
• 2.2.6 果蠅腦部病理切片染色結(jié)果41-42
• 3 討論42-45
• 3.1 藥物濃度與治療效應(yīng)42
• 3.2 雙點(diǎn)位學(xué)說42-43
• 3.3 自由基與氧化應(yīng)激43-44
• 3.4 線粒體損傷44-45
• 4 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 綜述49-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄62-63
• 致謝63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 ;Synthesis of Alkylene-linked Dimers of (-)-Huperzine A[J];Chinese Chemical Letters;2002年01期

2 吳婷;丁新生;董海蓉;王蔚;;MK-801對(duì)轉(zhuǎn)Aβ42基因果蠅阿爾茨海默病模型的神經(jīng)保護(hù)作用[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年12期

3 陳蕾;房雷;房旭彬;茍少華;;新型多靶向乙酰膽堿酯酶抑制劑抗阿爾茨海默病研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2010年21期

4 楊文超;孫琦;喻寧熙;朱曉磊;楊光富;;治療阿爾茨海默病的乙酰膽堿酯酶抑制劑的分子設(shè)計(jì):從多位點(diǎn)抑制劑到一藥多靶[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

本文編號(hào)：1111887