本文關(guān)鍵詞：雄激素對(duì)SAMP8小鼠海馬神經(jīng)元NMDA受體亞單位的影響

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【摘要】：目的:研究對(duì)象為SAMP8小鼠,觀察SAMP8小鼠去勢(shì)后以及去勢(shì)后通過補(bǔ)充治療睪酮和雙氫睪酮對(duì)海馬神經(jīng)元N-甲基-D-門冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受體亞單位NR1、NR2A和NR2B的影響,進(jìn)而探究其發(fā)生機(jī)制,為研究與雄激素相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病提供實(shí)驗(yàn)性依據(jù)。方法:選用40只6月齡SAMP8雄性小鼠,隨機(jī)分入4個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每一個(gè)實(shí)驗(yàn)組入選10只,分別為小鼠假手術(shù)組(P8組)、小鼠去勢(shì)組(Cast組)、小鼠去勢(shì)后補(bǔ)充治療睪酮組(T組)、小鼠去勢(shì)后補(bǔ)充治療雙氫睪酮組(DHT組)。小鼠同源對(duì)照組(R1組)選用10只6月齡SAMR1雄性小鼠。Cast組、T組以及DHT組三組一共30只小鼠全部切除睪丸(即去勢(shì)術(shù))。T組和DHT組于去勢(shì)后3天,分別腹腔注射睪酮5mg/(kg.day)和雙氫睪酮1mg/(kg.day),其余各實(shí)驗(yàn)組注射相同量玉米油溶液,每日注射1次,連續(xù)注射21日。免疫組織化學(xué)染色:R1組、P8組、Cast組、T組以及DHT組,每實(shí)驗(yàn)組各取5只小鼠,充分暴露小鼠心臟,灌注后取小鼠海馬組織,制備成石蠟切片,用于抗NR1、NR2A、NR2B免疫組織化學(xué)染色,測(cè)量5個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠海馬CA1區(qū)的平均光密度。蛋白免疫印跡:R1組、P8組、Cast組、T組以及DHT組,每實(shí)驗(yàn)組各取5只小鼠,麻醉后斷頭取腦,提取海馬組織蛋白,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度,對(duì)組織蛋白進(jìn)行變性。SDS-聚丙酰胺凝膠電泳,轉(zhuǎn)膜后進(jìn)行免疫反應(yīng)。以β-actin的表達(dá)為內(nèi)參,測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組蛋白相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果:1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果抗NR1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:Cast組陽性神經(jīng)元的平均光密度值(0.053±0.012)明顯低于R1組(0.272±0.015)、T組(0.193±0.009)和DHT組(0.197±0.011)(P0.05),P8組(0.186±0.013)與T組和DHT組比較無明顯差異(P0.05);抗NR2A免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:Cast組陽性神經(jīng)元的平均光密度值(0.014±0.002)明顯低于R1組(0.054±0.009)、T組(0.046±0.007)和DHT組(0.034±0.011)(P0.05),P8組(0.044±0.007)與T組和DHT組比較無明顯差異(P0.05);抗NR2B免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:Cast組陽性神經(jīng)元的平均光密度值(0.058±0.006)明顯低于R1組(0.104±0.008)、T組(0.077±0.004)和DHT組(0.084±0.007)(P0.05),P8組(0.087±0.007)與T組和DHT組比較無明顯差異(P0.05);2蛋白免疫印跡結(jié)果NR1蛋白免疫印跡結(jié)果:R1組海馬中NR1受體OD值為0.88±0.05,明顯高于其它實(shí)驗(yàn)組(P0.05)。Cast組海馬中NR1表達(dá)值為0.28±0.05,明顯低于其他組(P0.05)。P8組OD值為0.71±0.06。T組和DHT組OD值分別為0.63±0.05和0.66±0.04,明顯高于Cast組(P0.05);NR2A蛋白免疫印跡結(jié)果:R1組海馬中受體OD值為0.76±0.02,明顯高于其它實(shí)驗(yàn)組(P0.05)。Cast組海馬中NR2A表達(dá)OD值為0.23±0.02,明顯低于其他組(P0.05)。P8組OD值為0.63±0.05。T組和DHT組OD值分別為0.60±0.06和0.59±0.07,明顯高于Cast組(P0.05);NR2B蛋白免疫印跡結(jié)果:R1組海馬中NR2B受體OD值為0.66±0.03,明顯高于其它實(shí)驗(yàn)組(P0.05)。Cast組海馬中NR2B表達(dá)OD值為0.21±0.02,明顯低于其他組(P0.05)。P8組OD值為0.52±0.01。T組和DHT組OD值分別為0.53±0.03和0.52±0.04,明顯高于Cast組(P0.05)。結(jié)論:1 SAMP8小鼠去勢(shì)后,海馬NMDA受體亞單位NR1、NR2A以及NR2B蛋白含量顯著減少。2補(bǔ)充治療雄激素后,能夠增加海馬NMDA受體亞單位NR1、NR2A以及NR2B的蛋白含量。
【關(guān)鍵詞】：SAMP8小鼠 海馬 CA1區(qū) N-甲基-D-門冬氨酸受體 去勢(shì) 睪酮 雙氫睪酮
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-35
• 附表35-38
• 討論38-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 綜述 雄激素對(duì)海馬神經(jīng)元NMDA受體亞單位的影響48-59
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 致謝59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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本文編號(hào)：1057606