本文關鍵詞：天麻素對PTSD和MCAO模型的藥效學研究

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【摘要】：研究目的探討天麻素(gastrodin,GAS)對創(chuàng)傷后應激障礙(posttraumatic stress disorder,PTSD)模型大鼠行為學及海馬促炎癥因子水平的影響;探討天麻素對大腦中動脈缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型小鼠紋狀體髓鞘的保護作用及白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)水平的影響。研究方法本研究分為兩部分。實驗一:觀察天麻素對創(chuàng)傷后應激障礙模型大鼠焦慮樣行為、海馬促炎性因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、誘生型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,i NOS)、p38絲裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38絲裂原激活蛋白激酶(phosphorylated p38mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK)水平的影響。將大鼠隨機分為對照(Sham)組、模型(enhanced single prolonged stress,ESPS)組、模型+低劑量天麻素(GAS(L))組、模型+中劑量天麻素(GAS(M))組、模型+高劑量天麻素(GAS(H))組。Sham組大鼠正常飼養(yǎng);其余各組進行ESPS造模。造模結束后,Sham組和模型組腹腔注射生理鹽水,GAS(L)組、GAS(M)組、GAS(H)組分別接受不同劑量天麻素(50、100、200 mg/kg)干預,連續(xù)14 d。觀察指標包括:1.行為學觀察包括曠場實驗、高架十字迷宮實驗;2.采用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測IL-6、IL-1β水平;3.采用蛋白質免疫印跡法(Western Blot,WB)檢測i NOS、p38、p-p38蛋白表達情況。實驗二:觀察天麻素對MCAO模型小鼠神經功能的保護作用及紋狀體髓磷脂堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)、高分子量神經絲蛋白(neurofilament high molecular weight,NF-H)和缺血半腦內IL-1β水平的影響。將小鼠隨機分為對照(Sham)組、模型(MCAO)組、天麻素(GAS)組。Sham組小鼠接受假手術干預,其余各組接受MCAO造模,造模結束后,Sham組和MCAO組小鼠腹腔注射生理鹽水,GAS組小鼠接受天麻素(100mg/kg)干預,連續(xù)7 d。觀察指標包括:1.行為學觀察包括神經功能評分;2.2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色;3.采用ELISA方法檢測缺血側半腦IL-1β水平;4.采用免疫組織化學染色方法觀察紋狀體內MBP和NF-H表達情況。結果實驗大鼠經ESPS處理后出現(xiàn)焦慮樣行為表現(xiàn),IL-6、IL-1β水平增加,iNOS、p-p38表達增加,p-p38/p38比值增加;經不同劑量天麻素干預,特別是高劑量天麻素干預后,上述情況得到改善。實驗小鼠經MCAO處理后出現(xiàn)缺血性腦卒中樣行為表現(xiàn),神經功能評分減低,腦梗死容積增加,MBP和NF-H積分光密度減低,IL-1β水平增高,給與天麻素干預后,上述情況得到改善。具體如下:實驗一1.與Sham組比較,ESPS處理后大鼠進入中央區(qū)次數(shù)和進入中央區(qū)時間百分比減少(P0.01,P0.05);進入開臂探索次數(shù)和進入開臂探索時間百分比減少(P0.05,P0.01);海馬IL-6、IL-1β水平增加(P0.01,P0.01);海馬i NOS/β-actin比值、p-p38/β-actin比值增加(P0.01,P0.05);海馬p-p38/p38比值增加(P0.01),差異具有統(tǒng)計學意義。2.與ESPS組比較,GAS(M)組在進入中心區(qū)探索時間百分比增加(P0.05);進入開臂探索次數(shù)增加(P0.01);進入開臂探索時間百分比增加(P0.01);i NOS/β-actin的比值減少(P0.05);p-p38/p38比值減少(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。3.與ESPS組比較,GAS(H)組在進入中央區(qū)次數(shù)增加(P0.01);進入中央區(qū)時間百分比增加(P0.05);進入開臂探索次數(shù)增加(P0.01);進入開臂探索時間百分比增加(P0.01);海馬IL-6、IL-1β水平減低(P0.05,P0.05);i NOS/β-actin的比值減少(P0.01);p-p38/p38比值減少(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。實驗二1.Sham組神經功能評分及腦梗死容積均為0,與MCAO組相比,GAS組神經功能評分顯著減低(P0.05),GAS組腦梗死容積明顯減少(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。2.與Sham組相比,MCAO組MBP和NF-H染色的積分光密度顯著減低(P0.05),IL-1β水平增高(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。3.與MACO組比較,GAS組MBP和NF-H染色的積分光密度顯著增加(P0.05),IL-1β水平減低(P0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。結論天麻素能改善ESPS模型大鼠的焦慮樣行為,減少大鼠海馬IL-1和IL-1β水平,其可能是通過i NOS/p38信號通路而發(fā)揮效應的;同時天麻素可以改善MCAO模型小鼠神經功能損傷,抑制IL-1β水平,并對紋狀體髓鞘和神經纖維具有保護作用。
【關鍵詞】：天麻素 創(chuàng)傷后應激障礙 腦缺血再灌注損傷
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R749.5
【目錄】：

• 縮略語表5-9
• 中文摘要9-12
• 英文摘要12-16
• 前言16-18
• 文獻回顧18-28
• 1 炎癥系統(tǒng)簡介18-21
• 1.1 致炎因子18
• 1.2 細胞因子18-19
• 1.3 炎癥信號通路19-21
• 2 中樞神經系統(tǒng)與炎癥21-22
• 3 炎癥在神經精神疾病中的作用22-25
• 3.1 炎癥與抑郁癥22-23
• 3.2 炎癥與創(chuàng)傷后應激障礙23-24
• 3.3 炎癥與腦卒中24
• 3.4 炎癥與其他神經精神疾病24-25
• 4 天麻素的藥效學作用25-26
• 5 天麻素在神經精神疾病中的作用26-28
• 實驗一 天麻素對PTSD模型大鼠行為學及海馬促炎癥因子水平的影響28-45
• 1 材料28-31
• 2 方法31-36
• 3 結果36-41
• 4 討論41-45
• 實驗二 天麻素對腦缺血再灌注模型小鼠大腦及紋狀體髓鞘的保護作用及缺血半腦IL-1Β水平的影響45-57
• 1 材料45-46
• 2 方法46-49
• 3 結果49-53
• 4 討論53-57
• 小結57-58
• 參考文獻58-72
• 個人簡歷和研究成果72-73
• 致謝73

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本文編號：1049421