本文關(guān)鍵詞：體外電刺激對(duì)維生素C誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響

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【摘要】：目的探討電刺激在體外對(duì)誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPSCs)向心肌細(xì)胞分化的作用。方法復(fù)蘇小鼠來源的iPSCs,懸滴培養(yǎng)法形成擬胚體,維生素C誘導(dǎo)其分化,誘導(dǎo)過程按是否給予電刺激分為電刺激組與非電刺激組。觀察各組細(xì)胞生長(zhǎng)情況,記錄各組擬胚體出現(xiàn)跳動(dòng)的時(shí)間和跳動(dòng)擬胚體的數(shù)量,計(jì)算心肌細(xì)胞分化率。共聚焦顯微鏡成像結(jié)合免疫熒光細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)心肌特異性肌鈣蛋白T(c-TnT)的表達(dá)。RT-PCR檢測(cè)干細(xì)胞多能性標(biāo)志因子Oct-4、心肌早期特異性轉(zhuǎn)錄因子GATA-4和心肌特異性肌球蛋白α重鏈(α-MHC)的基因表達(dá)。結(jié)果電刺激組擬胚體較非電刺激組分化更快,更早出現(xiàn)搏動(dòng),心肌細(xì)胞分化率更高[(68.89±5.09)%vs(52.22±3.85)%,P0.05]。兩組搏動(dòng)區(qū)域細(xì)胞均表達(dá)c-TnT,電刺激組細(xì)胞c-TnT表達(dá)更明顯。在誘導(dǎo)過程中,Oct-4表達(dá)水平隨誘導(dǎo)時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減少,電刺激組較非電刺激組遞減更快(P0.05)。兩組均檢測(cè)到心肌特異性標(biāo)記分子GATA-4和α-MHC的表達(dá)。在誘導(dǎo)分化相同時(shí)間點(diǎn),電刺激組GATA-4和α-MHC表達(dá)水平高于非電刺激組(P0.05)。結(jié)論模擬心臟電學(xué)微環(huán)境的電刺激有助于維生素C誘導(dǎo)的iPSCs在體外向具有心肌細(xì)胞表型特征的細(xì)胞分化。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 電刺激 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 心肌細(xì)胞 分化
【基金】：重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(2009-1-51)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 通過導(dǎo)入特定的轉(zhuǎn)錄因子使體細(xì)胞重編程獲得的誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)可能為疾病提供“個(gè)體特異的”或“疾病特異的”細(xì)胞來源,避免干細(xì)胞研究領(lǐng)域的免疫排斥和倫理道德問題[1-3]。研究證明,iPSCs在體外能自發(fā)向心肌細(xì)胞分化,但其自然分化效

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