本文關(guān)鍵詞：小鼠miR-125b慢病毒過表達(dá)載體構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建小鼠胰腺β細(xì)胞NIT-1中miR-125b慢病毒過表達(dá)載體。方法從小鼠基因組DNA中用PCR擴增miR-125b的前體序列,經(jīng)NheⅠ和PstⅠ酶切后連接到Lv-CMV-GFP載體中,并對重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切鑒定和測序分析。將miR-125b過表達(dá)載體、pVSV-G和delta8.91質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,收獲慢病毒感染NIT-1細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分選陽性細(xì)胞,RT-PCR鑒定穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株中miR-125b的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建了miR-125b慢病毒表達(dá)載體,感染小鼠胰腺β細(xì)胞NIT-1后能夠成功過表達(dá)miR-125b。結(jié)論成功構(gòu)建miR-125b慢病毒過表達(dá)載體,為進(jìn)一步研究其功能建立了實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院膽胰外科;
【關(guān)鍵詞】： miR-b 慢病毒過表達(dá)載體 胰腺β細(xì)胞
【基金】：江蘇省高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程(PAPD)
【分類號】：R-332
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA)是一類長19-25bp的單鏈非編碼小分子RNA,它們能通過與靶基因mRNA 3′-非翻譯區(qū)(UTR)特異性的堿基配對導(dǎo)致其降解或翻譯阻遏,在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的表達(dá)[1]。近年來研究發(fā)現(xiàn),miRNA參與了包括細(xì)胞發(fā)育、增殖、凋亡等生理過程及心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)

【相似文獻(xiàn)】

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1 肖艷森 ,余璐;受照人群中T細(xì)胞抗原受體基因表達(dá)缺陷的T淋巴細(xì)胞突變率[J];國際放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)雜志;1992年01期

2 閔密克,朱勇,金伯泉,賈衛(wèi),劉雪松;一組小鼠抗大鼠單克隆抗體的鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2000年01期

3 馮永東,陶德定,覃吉超,高純,申漫里,冷艷,余源,龔建平;雙光源流式細(xì)胞術(shù)三參數(shù)細(xì)胞周期分析(英文)[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2005年02期

4 柯杭君,李清芬,李卓婭,姜小丹,馮瑋,徐勇,熊平;抗人跨膜型腫瘤壞死因子-α多克隆抗體的制備和鑒定[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年04期

5 陳燕花;陳振兵;康皓;王發(fā)斌;洪光祥;;三磷酸腺苷對小鼠肌源性干細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響[J];中華實驗外科雜志;2006年02期

6 邱小忠;李小娜;陳維毅;余磊;廖華;焦培峰;賴桂華;歐陽鈞;;周期性機械拉伸對C2C12成肌細(xì)胞增殖的影響[J];中國臨床解剖學(xué)雜志;2006年02期

7 陸東風(fēng);吳昊;黃t，

本文編號：964698