重金屬鉛免疫復(fù)合物的制備與鑒定
發(fā)布時(shí)間:2017-09-30 05:00
本文關(guān)鍵詞:重金屬鉛免疫復(fù)合物的制備與鑒定
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【摘要】:目的制備Pb-DTPA-BSA復(fù)合物,作為完全抗原,用以免疫動(dòng)物制備鉛抗體。方法首先用金屬螯合劑二乙基三胺五乙酸(Diethylene triamine pentacetate,DTPA)與鉛離子(Pb2+)結(jié)合,再分別用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)、戊二醛、三乙胺作偶聯(lián)劑將其與大分子載體蛋白-牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)偶聯(lián),制備Pb-DTPA-BSA復(fù)合物。將復(fù)合物做聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix-Assisted Laser Desorption Time of Flight mass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)鑒定并免疫小鼠,獲得抗PbDTPA抗體。結(jié)果 SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS結(jié)果均驗(yàn)證合成了復(fù)合物Pb-DTPA-BSA,平均分子量76435;Pb-DTPA與BSA的偶聯(lián)比為11∶1。免疫小鼠后,小鼠血清中產(chǎn)生了抗Pb-DTPA抗體,抗體最高效價(jià)達(dá)到1.0×105。結(jié)論經(jīng)分析證明成功合成了免疫復(fù)合物Pb-DTPA-BSA,可用于重金屬Pb抗體的制備。
【作者單位】: 天津市環(huán)境與食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)控技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所;
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【基金】:國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(2013AA065601,2010AA06Z302) 國(guó)土資源部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201211056)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 由于工業(yè)三廢及汽車尾氣的排放,環(huán)境中重金屬污染越來越嚴(yán)重,空氣、土壤、水、食品以及中草藥中重金屬污染日益受到重視。重金屬離子自身帶有電荷,趨向于與生物分子發(fā)生強(qiáng)烈的不可逆的反應(yīng),這也是重金屬的毒性所在。重金屬自身不能作為有效的抗體識(shí)別目標(biāo),利用選擇性螯合劑與
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
1 孫博思;趙麗嬌;任婷;鐘儒剛;;水環(huán)境中重金屬檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2012年07期
2 唐勇,向軍儉,羅輝武,鄧寧,王宏;重金屬鎘離子單克隆抗體的制備[J];食品科學(xué);2005年09期
3 黃峙,向軍儉;重金屬-螯合劑復(fù)合物McAb制備及免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展[J];衛(wèi)生研究;2004年06期
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 車曉青;郭明;;重金屬殘留的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J];福建分析測(cè)試;2009年04期
2 楊鳳麗;朱曉霞;胡白石;徐麗娜;婁e,
本文編號(hào):946234
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