本文關(guān)鍵詞：大鼠枯否細(xì)胞的分離、鑒定以及LPS刺激誘導(dǎo)TNF-α的表達(dá)

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【摘要】：目的:分離、培養(yǎng)和鑒定枯否細(xì)胞,并探討LPS刺激對細(xì)胞腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達(dá)和分泌的影響.方法:采用在體原位灌注、密度梯度離心和早期細(xì)胞換液等方法分離純化大鼠肝枯否細(xì)胞(kupffer cell,KC),并采用墨汁吞噬和ED2染色試驗(yàn)對分離培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定.TNF-α表達(dá)和分泌采用RT-PCR和酶聯(lián)免疫技術(shù)(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)檢測.結(jié)果:成功分離和純化大鼠肝KC,并經(jīng)墨汁吞噬和ED2染色試驗(yàn)鑒定證實(shí);LPS刺激KC細(xì)胞內(nèi)TNF-α mRNA的表達(dá)較非刺激細(xì)胞(PBS處理細(xì)胞)顯著升高(1.10±0.02vs0.09±0.01,P0.001).另外,LPS刺激較非刺激KC培養(yǎng)上清液TNF-α蛋白的水平也顯著升高(487.10pg/mL±5.56pg/mLvs39.41pg/mL±15.30pg/mL,P0.001).結(jié)論:原位灌注和密度梯度離心法能有效分離純化大鼠KC,LPS刺激可誘導(dǎo)其表達(dá)和分泌大量TNF-α.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院松江分院;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 枯否細(xì)胞 培養(yǎng) 脂多糖 腫瘤壞死因子-α
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目,Nos.81070357,30660066~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言枯否細(xì)胞(kupffer cell,KC)是一種非實(shí)質(zhì)性肝細(xì)胞,其數(shù)量約占肝細(xì)胞總數(shù)的15%和體內(nèi)組織駐留巨噬細(xì)胞總數(shù)的80%-90%[1].KC被覆于肝竇內(nèi)壁,在穩(wěn)定或生理情況下,可作為“專業(yè)化”的吞噬細(xì)胞[2],以清除衰老的紅細(xì)胞、免疫復(fù)合物和來自門脈循環(huán)的腸源性細(xì)菌產(chǎn)物[1].在功能上,

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曾仲;黃漢飛;宋飛;段鍵;;體外灌注法分離大鼠肝臟Kupffer細(xì)胞及原代培養(yǎng)[J];世界華人消化雜志;2009年25期

2 張磊;黃成;李俊;呂雄文;朱鵬里;王建青;李增;賀曉昕;;大鼠肝星狀細(xì)胞和枯否細(xì)胞的分離與培養(yǎng)方法[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年06期

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本文編號：944053