本文關(guān)鍵詞：P19細(xì)胞過表達(dá)外源Necdin對其細(xì)胞增殖的影響

  更多相關(guān)文章： Necdin 載體構(gòu)建 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 P細(xì)胞 過表達(dá) 細(xì)胞增殖

【摘要】：構(gòu)建PcDNA3.1/necdin真核表達(dá)載體并制備穩(wěn)定過表達(dá)Necdin的P19細(xì)胞克隆,檢測穩(wěn)定過表達(dá)Necdin對P19細(xì)胞增殖的影響。從正常培養(yǎng)P19細(xì)胞提取RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,以此作為PCR模板擴(kuò)增得到necdin目的基因,插入PcDNA3.1載體的EcoRⅠ和XhoⅠ位點(diǎn);脂質(zhì)體法將構(gòu)建的真核表達(dá)載體PcDNA3.1/necdin轉(zhuǎn)染P19細(xì)胞,G418篩選后挑取細(xì)胞單克隆,Western印跡鑒定細(xì)胞單克隆中Necdin的表達(dá)水平。CCK-8法檢測過表達(dá)necdin對P19細(xì)胞增殖的影響。成功構(gòu)建PcDNA3.1/necdin真核表達(dá)載體并獲得穩(wěn)定高表達(dá)Necdin的P19細(xì)胞克隆,檢測發(fā)現(xiàn)P19細(xì)胞過表達(dá)Necdin后其細(xì)胞增殖未發(fā)生明顯變化。P19細(xì)胞穩(wěn)定過表達(dá)外源Necdin對其細(xì)胞增殖無明顯影響。
【作者單位】： 中南大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： Necdin 載體構(gòu)建 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 P細(xì)胞 過表達(dá) 細(xì)胞增殖
【基金】：北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(5112027)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： P19胚胎瘤細(xì)胞(P19 embryonal carcinoma cells,P19ECCs)[1]來源于C3H/He雄性小鼠的畸胎瘤,具有多向分化潛能及較強(qiáng)的再生能力。例如,在10-6MRA誘導(dǎo)下,向神經(jīng)細(xì)胞方向分化,并分化為多種類型的神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞[2],在此過程中,神經(jīng)發(fā)生過程中相關(guān)基因的表達(dá)模式與正常小鼠

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 畢玉田;王彥;吳奎;王長征;錢桂生;;Der p2基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在小鼠樹突狀細(xì)胞中表達(dá)[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年11期

2 伊海英;孫曉艷;付小兵;任明姬;張廣田;高瑗;;堿性成纖維細(xì)胞生長因子基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];感染.炎癥.修復(fù);2008年03期

3 劉潔婷;郭冉;劉海峰;董凱;初彥輝;;截短型TGF-β Ⅱ型受體原核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年01期

4 張洪海;計云霞;孫玉;張玉林;喬錄新;崔丹;陳德喜;;分泌型堿性磷酸酶示蹤的TA克隆真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];北京醫(yī)學(xué);2010年06期

5 趙忠良,黃欣,陳蘇民,曹雪濤;克隆、表達(dá)及測序一體化的原核表達(dá)載體pLCM182的構(gòu)建及在細(xì)胞因子表達(dá)中的應(yīng)用[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2000年02期

6 楊明峰,陳永井,張光波,毛一香,瞿秋霞,張學(xué)光;一種高效逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pSIV-1的構(gòu)建及其功能的初步鑒定[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2005年06期

7 陶應(yīng)雙;戴長柏;;脊髓灰質(zhì)炎病毒作載體構(gòu)建嵌合病毒的現(xiàn)狀及前景[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1991年05期

8 王政;李為民;徐華鋒;董廣濤;;MMP-2特異性RNA干擾真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年04期

9 黃帆;徐康;吳興剛;馬中富;林正;;抗熱休克蛋白72多克隆抗體血清的制備和檢測[J];中國危重病急救醫(yī)學(xué);2006年09期

10 賀紅霞;林春晶;王銘;董英山;;乙肝表面抗原基因表達(dá)載體的構(gòu)建及對百脈根的轉(zhuǎn)化[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2007年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王麗梅;路長林;耿美玉;;神經(jīng)細(xì)胞黏附因子L1基因的克隆、表達(dá)及胞外結(jié)構(gòu)域功能的研究[A];科技、工程與經(jīng)濟(jì)社會協(xié)調(diào)發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

2 吳燕;丁愛石;馬子敏;吳麗穎;李海生;朱玲玲;趙彤;范明;;定向誘導(dǎo)P19細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞[A];中國生理學(xué)會第21屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

3 楊大莉;白戈;景乃禾;;二甲亞砜誘導(dǎo)P19細(xì)胞定向分化為5-羥色胺能神經(jīng)元[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)、免疫細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2002年

4 吳麗穎;吳燕;丁愛石;李海生;趙惠卿;趙彤;朱玲玲;范明;;不同程度低氧對P19細(xì)胞增殖與分化的作用[A];中國生理學(xué)會第六屆應(yīng)用生理學(xué)委員會全國學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

5 師偉;裴雪濤;;HOXB4基因的表達(dá)譜初步研究與HOXB4基因的克隆及相關(guān)載體構(gòu)建[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2003年

6 劉文文;趙永波;;大鼠GDNF真核表達(dá)載體構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

7 潘俊杰;施海明;羅心平;李劍;梁旺;張進(jìn);馬端;;U937單核細(xì)胞轉(zhuǎn)染中幾種不同方法的比較[A];第十次中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會心血管病學(xué)術(shù)大會暨第五次江西省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會心血管病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2010年

8 李克;王琳;成軍;張玲霞;陸蔭英;李莉;;丙型肝炎病毒核心蛋白基因的表達(dá)載體構(gòu)建及在酵母中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國感染病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

9 林志娟;馮永堂;牟東珍;苗乃法;梁淑娟;邸大琳;吳國慶;王麗娜;魏兵;杜雪梅;;小鼠OX40原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

10 陶愛林;何韶衡;;重疊引物與橋式PCR結(jié)合進(jìn)行過敏原蛋白表達(dá)載體構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會第二次全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 吳一福;四軍醫(yī)大構(gòu)建HBV全基因克隆質(zhì)粒細(xì)胞系[N];中國醫(yī)藥報;2006年

2 吳理茂 李連達(dá);中藥在心肌細(xì)胞移植中的作用[N];中國醫(yī)藥報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡澤斌;溶瘤腺病毒載體系統(tǒng)的構(gòu)建及其功能研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

2 尹青;應(yīng)用不同方法體外誘導(dǎo)P19細(xì)胞心肌細(xì)胞分化的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

3 張金平;外源表達(dá)Nkx2-5基因誘導(dǎo)P19細(xì)胞心肌分化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

4 王丁丁;重組人抗狂犬病毒抗體的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2007年

5 張遵真;DNA氧化損傷修復(fù)基因HOGG1低表達(dá)細(xì)胞株的建立及其應(yīng)用研究[D];四川大學(xué);2005年

6 馮凱;18個重要炎癥相關(guān)基因SNP分析及TLR4基因5’區(qū)SNP功能研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 朱中元;結(jié)核DNA疫苗的構(gòu)建、免疫功能及保護(hù)效果研究[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

8 段朝霞;TLR4、GR基因多態(tài)性分析及TLR4基因3’UTR 11 367多態(tài)性位點(diǎn)功能研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 李長貴;脊灰病毒Sabin1株疫苗載體構(gòu)建及在流感通用型疫苗研制中的初步應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 宿曉云;完整人抗乙肝表面抗體的克隆及重組表達(dá)[D];吉林大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于曉明;人乳鐵蛋白乳腺真核表達(dá)載體pBC1-hLF的構(gòu)建[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

2 周懷瑜;弓形蟲表面抗原P30與免疫佐劑CTA2/B復(fù)合基因在畢赤酵母中的分泌表達(dá)、純化與鑒定[D];山東大學(xué);2005年

3 唐文琴;人生長激素受體的定點(diǎn)突變及其真核表達(dá)[D];江西師范大學(xué);2007年

4 劉向陽;慢病毒載體表達(dá)人B型利鈉肽的方法學(xué)探討[D];華中科技大學(xué);2006年

5 李楠;單細(xì)胞檢測SKOV3細(xì)胞轉(zhuǎn)染端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因的表達(dá)及在監(jiān)測體外培養(yǎng)胚胎細(xì)胞中的應(yīng)用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 張丹;脂聯(lián)素基因表達(dá)載體的構(gòu)建及體外表達(dá)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2005年

7 陳煒;催產(chǎn)素誘導(dǎo)P19細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

8 胡松權(quán);大鼠δ阿片受體RNA干擾質(zhì)粒構(gòu)建和作用分析[D];華中科技大學(xué);2010年

9 徐瑛;神經(jīng)細(xì)胞特異性Cre重組酶表達(dá)載體的構(gòu)建及其體外表達(dá)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

10 呂愛紅;脂肪干細(xì)胞轉(zhuǎn)染hEGF基因和應(yīng)用于創(chuàng)面修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2012年

，

本文編號：927003