本文關鍵詞：丙型肝炎病毒核心蛋白對Dicer切割功能的影響

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【摘要】：目的探討核心蛋白與Dicer的相互作用及其對Dicer功能的影響。方法構建丙型肝炎病毒核心蛋白真核表達質粒,采用免疫熒光染色和Western blot檢測核心蛋白的表達,Western blot檢測核心蛋白對細胞內Dicer表達的影響,免疫共沉淀技術檢測真核細胞內核心蛋白與Dicer的相互作用。體外轉錄合成dsRNA,檢測核心蛋白對Dicer切割dsRNA作用的影響。結果在細胞內,核心蛋白能夠明顯恢復被shRNA抑制的蟲熒光素酶基因的表達(P0.05),而對siRNA引發(fā)的RNAi無拮抗作用。在真核細胞內,加入核心蛋白后,Dicer的表達量無明顯改變,并能檢測到兩者相互結合。在體外抑制實驗中,重組表達的Dicer能切割dsRNA產生siRNA;核心蛋白加入后,dsRNA的切割受到抑制。結論核心蛋白在真核細胞內可以結合Dicer,并通過抑制Dicer對dsRNA的切割作用,抑制RNA干擾作用。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 丙型肝炎病毒 核心蛋白 Dicer酶 免疫共沉淀
【基金】：國家自然科學基金(30972582,30500428)~~
【分類號】：R373.21
【正文快照】： RNA干擾(RNA interference,RNAi)是一種由雙鏈RNA介導的、轉錄后mRNA水平關閉相應基因表達的序列特異性基因沉默機制,在人類抵抗RNA病毒的過程中有重要作用[1]。Dicer是RNAi形成過程中所必需的一種核酸內切酶。它通過切割雙鏈RNA或者發(fā)夾狀RNA(shRNA)來產生小干擾RNA(small in

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮德云;李波;鄭暉;程瑞雪;曹亞;;丙型肝炎病毒核心蛋白對核轉錄因子stat3活性的調控作用[J];中南大學學報(醫(yī)學版);2005年06期

2 孫貝貝;張敬;石紅軍;Hiroaki Kohno;張軍;;丙型肝炎病毒截短型核心基因表達載體的構建與表達[J];同濟大學學報(醫(yī)學版);2009年05期

3 萬祥輝;曾照芳;楊細媚;;丙型肝炎病毒基因分型及core蛋白區(qū)的分子演化分析[J];生物化學與生物物理進展;2008年08期

4 成軍,李克,劉妍,王琳,陸蔭英,鐘彥偉;HCBP6對HCV核心蛋白反式激活作用的影響[J];世界華人消化雜志;2004年04期

5 顏學兵;傅涓涓;季芳;汪莉萍;梅蕾;潘修成;韓方正;張言超;;丙型肝炎病毒核心蛋白與信號轉導及轉錄活化蛋白3的相互作用[J];現(xiàn)代免疫學;2006年05期

6 成軍;劉妍;陸蔭英;李克;王琳;;丙型肝炎病毒與MAPK信號轉導系統(tǒng)[J];世界華人消化雜志;2003年04期

7 韋三華;尹文;雷迎風;胡興斌;呂欣;楊敬;孫夢寧;徐志凱;;丙型肝炎病毒核心區(qū)截短型基因真核表達載體的構建及其在中國倉鼠卵巢細胞中的表達[J];醫(yī)學研究生學報;2005年12期

8 顏學兵;梅蕾;潘修成;韓方正;汪莉萍;張言超;;基因1b型不同準種株HCV核心蛋白真核表達質粒的構建及表達[J];江蘇醫(yī)藥;2007年03期

9 陳輝;高娜;范東瀛;鄭群;王娟;安靜;;重組丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表達、純化和抗體制備[J];微生物與感染;2010年03期

10 陳天艷;劉敏;陳云茹;藺淑梅;葉峰;張曦;劉錦鋒;趙英仁;張樹林;;HCBP1的細胞定位及與HCV核心蛋白在體內的相互作用[J];南方醫(yī)科大學學報;2007年12期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱立新;劉晶;李迎春;孔玉英;STAIB Caroline;SUTTER Gerd;汪垣;李光地;;HCV E2的復雜糖化依賴于全長核心蛋白序列[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術會議論文摘要集[C];2001年

2 常燕子;陸蒙吉;楊東亮;;HCV核心蛋白對IFN-α誘導的抗病毒分子表達的影響及其機制[A];第六屆全國免疫學學術大會論文集[C];2008年

3 龔作炯;;丙型肝炎病毒的病毒學及抗病毒靶位[A];全國第3屆中西醫(yī)結合傳染病學術會議暨中國中西醫(yī)結合學會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

4 俞小瑞;于杰;田夢玉;;腦中蛋白聚糖核心蛋白分子結構的研究[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術會議論文摘要集[C];2001年

5 黃茜;張仁利;耿藝介;黃達娜;高世同;胡章立;;丙型肝炎核心蛋白基因的克隆及原核表達[A];中華醫(yī)學會第一屆全國公共衛(wèi)生學術會議暨第四屆中國現(xiàn)場流行病學培訓項目匯編[C];2009年

6 朱研;譚朝霞;范焱;張長江;王小紅;;丙型肝炎病毒動態(tài)準種優(yōu)勢株的確定[A];全國第3屆中西醫(yī)結合傳染病學術會議暨中國中西醫(yī)結合學會傳染病專業(yè)委員會第2屆委員會議論文匯編[C];2010年

7 竇曉光;李智偉;王兆荃;;不同基因型丙型肝炎病毒NS5a高免疫源區(qū)基因在大腸桿菌中的表達及其抗原性檢測[A];中華醫(yī)學會第七次全國感染病學術會議論文匯編[C];2001年

8 徐寧志;;SARS病毒核心蛋白(The Nucleocapsid Protein in SARS-Coronavirus)的蛋白質組研究策略[A];中國蛋白質組學首屆學術大會論文摘要集[C];2003年

9 王敏;韓紅星;蔣小玲;陸堅;徐六妹;;HCV RNA定量檢測與基因分型的研究[A];第一次全國中西醫(yī)結合傳染病學術會議論文匯編[C];2006年

10 高得勇;張欣欣;侯剛;徐念沁;金根娣;張東華;陸志檬;;丙型肝炎病毒F蛋白和C蛋白克隆表達及純化[A];中華醫(yī)學會全國第九次感染病學學術會議論文匯編[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳一福;西安交大：用人胎兒軟骨細胞培養(yǎng)成功軟骨組織工程種子細胞[N];中國醫(yī)藥報;2006年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 廖慶姣;丙型肝炎病毒核心蛋白和NS5A蛋白對NF-κB的激活研究[D];武漢大學;2005年

2 彭梅;重組丙型肝炎病毒結構蛋白抗原表位的表達及免疫原性[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2001年

3 顏學兵;不同截短片段基因1b型丙型肝炎病毒核心蛋白功能研究[D];浙江大學;2005年

4 陳麗珊;丙型肝炎病毒多表位抗原基因pcx3的構建、表達及免疫原性研究[D];復旦大學;2005年

5 朱詩應;丙型肝炎病毒結構基因的表達及其病毒樣顆粒研究[D];第二軍醫(yī)大學;2005年

6 李衛(wèi)華;表達HCV-NS3抗原的重組腺病毒載體疫苗的實驗研究[D];四川大學;2005年

7 陳維賢;丙型肝炎病毒核心蛋白抑制RNA干擾的機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2007年

8 胡巍;丙型肝炎病毒NS3蛋白酶及抑制肽研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

9 鄭義;丙型肝炎病毒NS4B蛋白的功能[D];武漢大學;2005年

10 許信剛;逆轉錄病毒載體介導的丙型肝炎病毒（HCV）囊膜蛋白基因的表達及抗HCV中和抗體的研究[D];西北農林科技大學;2005年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉敏;小干擾RNA對丙型肝炎病毒核心蛋白基因表達的抑制作用[D];第二軍醫(yī)大學;2006年

2 李洪濤;HIV-1 Tat蛋白對HCV RNA復制和蛋白表達的影響[D];中南大學;2008年

3 傅濤;HCV多表位復合抗原合成肽的免疫學性狀分析[D];昆明醫(yī)學院;2005年

4 劉艷;丙型肝炎病毒體外培養(yǎng)細胞模型的初步研究[D];中國藥品生物制品檢定所;2005年

5 張敏睿;丙型肝炎病毒核心蛋白在大腸桿菌和畢赤酵母中的表達[D];西北大學;2006年

6 湯兆明;用噬菌體隨機肽庫篩選丙型肝炎病毒抗原表位[D];福建醫(yī)科大學;2005年

7 沈才飛;不同缺失突變的丙型肝炎病毒核蛋白在大腸桿菌中的表達[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

8 郭江;丙型肝炎病毒p7蛋白反式調節(jié)作用的研究[D];山西醫(yī)科大學;2005年

9 李暉;福建地區(qū)HCV基因型及Core蛋白的差異研究[D];福建醫(yī)科大學;2006年

10 賈鐵留;丙型肝炎病毒HVR1區(qū)準種的研究[D];昆明理工大學;2006年

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本文編號：887709