本文關(guān)鍵詞：類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染RAW264.7細(xì)胞模型的建立

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【摘要】：目的建立類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的細(xì)胞模型,為進(jìn)一步研究其致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法摸索類鼻疽伯克霍爾德氏菌培養(yǎng)條件、構(gòu)建模型的感染條件(e.g.感染復(fù)數(shù),感染時(shí)間),通過(guò)吉姆薩染色、透射電鏡、活細(xì)胞工作站動(dòng)態(tài)觀察等確證胞內(nèi)感染和宿主細(xì)胞的形態(tài)變化,分析病原菌侵襲率、胞內(nèi)復(fù)制率和宿主反應(yīng)性來(lái)評(píng)價(jià)該模型中病原菌侵入RAW264.7特點(diǎn)和病理?yè)p傷類型。結(jié)果確定了類鼻疽伯克霍爾德氏菌的一般培養(yǎng)條件,感染復(fù)數(shù)MOI=100感染宿主細(xì)胞,170g離心5min后37℃共孵1h以利于細(xì)菌侵入胞內(nèi),含250μg/ml卡那霉素的DMEM-10培養(yǎng)以殺死胞外病原菌。形態(tài)觀察,類鼻疽伯克霍爾德氏菌感染后最早8h可觀察到異物多核巨細(xì)胞(MNGC),RAW264.7細(xì)胞伸出偽足,相互融合。感染初期(3h)TNF-α升高較快,9h后則下降至低值,直至感染后期(15～24h)再次升高。結(jié)論成功構(gòu)建類鼻疽伯克霍爾德氏菌胞內(nèi)感染模型,擬為進(jìn)一步研究其致病機(jī)制提供了條件。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系臨床微生物教研室;第三軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系臨床血液教研室;
【關(guān)鍵詞】： 類鼻疽伯克霍爾德氏菌 小鼠巨噬細(xì)胞(RAW.) 細(xì)胞模型
【分類號(hào)】：S852.61;R378
【正文快照】： 類鼻疽伯克霍爾德氏菌(Burkholderia pseud-omallei)又稱類鼻疽桿菌,屬于假單胞菌屬,2006年被美國(guó)CDC列為B類生物恐怖劑。它能感染機(jī)體幾乎任何器官,導(dǎo)致的疾病稱類鼻疽,是一種典型的熱帶疾病,有很高的誤診和死亡率,是一種正在擴(kuò)散的人獸共患病[1-2]。急性感染主要表現(xiàn)為急性

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