本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌熱休克蛋白A核酸疫苗的構(gòu)建

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【摘要】：目的構(gòu)建幽門螺桿菌(Hp)熱休克蛋白A(HspA)亞單位核酸疫苗,為進(jìn)一步研制Hp核酸多價疫苗提供技術(shù)平臺。方法以PMD-HspA為模板,擴(kuò)增、純化Hp hspA基因,插入到真核表達(dá)載體PcDNA3中,轉(zhuǎn)化大腸埃希菌DH5a,經(jīng)氨芐西林抗性篩選陽性克隆,得到重組核酸疫苗pcDNA3-HspA,用特異性PCR方法和小提質(zhì)粒酶切電泳鑒定重組質(zhì)粒,同時將pcDNA3-HspA進(jìn)行測序,進(jìn)一步確定是否構(gòu)建成功及鑒定構(gòu)建過程中是否發(fā)生基因突變。結(jié)果 PCR鑒定結(jié)果顯示,擴(kuò)增產(chǎn)物為0.36kb的目的基因;酶切鑒定結(jié)果顯示,得到5.45kb克隆載體片段和0.36kb的目的基因片段;重組質(zhì)粒pcDNA3-HspA測序,得到基因全長357bp目的基因片段,與克隆質(zhì)粒測序圖比較,無基因變異。結(jié)論成功構(gòu)建了Hp單價核酸疫苗pcDNA3-HspA,為研制Hp核酸多價疫苗奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗科;
【關(guān)鍵詞】： 幽門螺桿菌 核酸疫苗 hspA基因
【基金】：河南省科技攻關(guān)計劃項目(102102310154) 河南省高校科技創(chuàng)新人才項目(2012HASTIT024) 河南省高校青年教師骨干項目(2010GGJS-117) 河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點項目(12A320017)
【分類號】：R392
【正文快照】： 幽門螺桿菌(Hp)是目前發(fā)現(xiàn)惟一的能夠在人體胃內(nèi)定植、生存的細(xì)菌,在臨床主要應(yīng)用抗菌藥物加質(zhì)子泵抑制劑或鉍鹽的三聯(lián)療法治療Hp感染,但是存在治療周期長、易復(fù)發(fā)、患者的依從性差等諸多缺點。熱休克蛋白(Hsp)A亞單位作為Hsp的主要功能單位,與尿素酶、VacA蛋白及過氧化物酶

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉志杰;邱宏;周秀萍;李秀萍;;幽門螺桿菌Lpp20真核表達(dá)重組體的構(gòu)建及其表達(dá)鑒定[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年09期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 姜茵;奚悅;王小平;何殿殿;李妍;;幽門螺桿菌Lpp20融合蛋白的表達(dá)、標(biāo)簽切除及鑒定[J];生物技術(shù);2011年04期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉秀麗,李淑琴,劉純杰,陶好霞,李R，

本文編號：884975