本文關(guān)鍵詞：Osbpl2基因在高脂血癥小鼠模型中的表達(dá)與定位

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【摘要】：目的：觀察Osbpl2基因在高脂血癥小鼠耳蝸中的表達(dá),探討高脂飲食干預(yù)對(duì)小鼠聽力的影響機(jī)制。方法：選擇出生6周C57BL/6J小鼠65只(南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所提供),隨機(jī)分為高脂組(40只)和對(duì)照組(25只),分別采用高脂飼料(南京協(xié)同生物,脂含量60%)和普通飼料喂養(yǎng)。8周后,各小鼠均在深度麻醉狀態(tài)下行短純音聽性腦干反應(yīng)(auditory brainstem response, ABR)測試(美國TDT公司BioSig System Ⅲ型),使用試劑盒測量血脂水平(中生北控生物科技股份有限公司)；隨后,快速斷頭分離耳蝸后OCT包埋、切片,行免疫熒光組織化學(xué)來觀察Osbpl2基因的分布及表達(dá)情況,掃描電鏡觀察靜纖毛排列情況,取耳蝸等多種組織提取RNA進(jìn)行相關(guān)基因的表達(dá)分析。結(jié)果：1)高脂組小鼠的高頻聽力損失較對(duì)照組明顯；2)高脂組小鼠的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、動(dòng)脈硬化指數(shù)均高于對(duì)照組小鼠,高密度脂蛋白低于對(duì)照組；3)激光共聚焦顯微鏡觀察小鼠耳蝸切片及耳蝸基底膜鋪片,Osbpl2基因在高脂組及對(duì)照組小鼠耳蝸血管紋、毛細(xì)胞、螺旋神經(jīng)節(jié)處均有表達(dá),但高脂組的表達(dá)明顯低于對(duì)照組。正常對(duì)照組小鼠基底膜鋪片可見完整排列的內(nèi)毛細(xì)胞和外毛細(xì)胞,高脂血癥組小鼠基底膜鋪片可見外毛細(xì)胞缺失、排列紊亂；4)熒光定量PCR分析小鼠8種組織(心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、肌肉、腦、耳蝸)中Osbpl2基因的表達(dá)情況,結(jié)果顯示高脂組各組織的Osbpl2基因相對(duì)定量均低于正常對(duì)照組,此現(xiàn)象在耳蝸中更加明顯(p0.01)；5)電鏡掃描結(jié)果顯示高脂血癥小鼠內(nèi)毛細(xì)胞靜纖毛倒伏,外毛細(xì)胞靜纖毛缺失、排列紊亂,此現(xiàn)象在底回尤為明顯。結(jié)論：Osbpl2基因在小鼠耳蝸中廣泛表達(dá)；高脂飲食干預(yù)引發(fā)的高脂血癥可導(dǎo)致小鼠的聽力下降和內(nèi)耳形態(tài)學(xué)改變,而Osbpl2下調(diào)可能在高脂血癥小鼠聽力損失的發(fā)生中起重要作用。
【關(guān)鍵詞】：Osbpl2基因 高脂血癥 小鼠 聽力損失 聽性腦干反應(yīng) 免疫組化 掃描電鏡
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.2;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-27
• 討論27-35
• 參考文獻(xiàn)35-41
• 文獻(xiàn)綜述41-63
• 參考文獻(xiàn)53-63
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況63-64
• 致謝64

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