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毛細管電泳激光誘導熒光法優(yōu)化量子點-轉(zhuǎn)鐵蛋白偶聯(lián)體系及用于細胞標記

發(fā)布時間:2017-09-16 17:24

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【摘要】:利用毛細管電泳激光誘導熒光(CE-LIF)表征了偶聯(lián)劑N-羥基硫代琥珀酰亞胺(NHS)及NHS和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)混合偶聯(lián)劑對CdTe量子點活化效果的差異,優(yōu)化了CdTe與轉(zhuǎn)鐵蛋白(Trf)的偶聯(lián)條件,比較了CdTe-Trf,CdTe-BSA偶聯(lián)物及CdTe量子點對Hela細胞的標記效果。結(jié)果表明:NHS活化后的量子點性能優(yōu)于混合偶聯(lián)劑EDC-NHS。31.2μmol/L Trf與CdTe形成的偶聯(lián)物CdTe-Trf對Hela細胞的標記效果最佳。CdTe-Trf在4℃孵育20 min可快速標記在Hela細胞的表面;在37℃孵育7 h后,可進入Hela細胞內(nèi)。說明所制得的CdTe-Trf偶聯(lián)物具有Trf的生物功能,它可通過特異性識別并結(jié)合細胞膜表面的Trf受體而轉(zhuǎn)入Hela細胞。而CdTe-BSA偶聯(lián)物的標記不具特異性,CdTe則不能用于Hela細胞的標記。
【作者單位】: 北京理工大學生命學院;北京市理化分析測試中心;
【關(guān)鍵詞】毛細管電泳-激光誘導熒光(CE-LIF) 量子點 轉(zhuǎn)鐵蛋白 偶聯(lián) 細胞標記
【基金】:國家自然科學基金(Nos.21175011,20875009) 國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(No.2012CB0603)資助
【分類號】:R329;O657.3
【正文快照】: 1引言轉(zhuǎn)鐵蛋白(Trf)是脊椎動物體中一種非血紅素結(jié)合鐵的β-球蛋白,可與細胞膜上的Trf受體結(jié)合,內(nèi)吞化形成內(nèi)吞小體。在特定信號介導下,Trf可以通過釋放鐵離子,轉(zhuǎn)移出細胞膜外。由于惡性腫瘤細胞過度表達Trf受體,因此,通過標記Trf可進行腫瘤細胞的識別、診斷和治療研究[1,2]

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