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抑制Larp4b表達(dá)不影響小鼠Lin~-造血細(xì)胞集落形成能力

發(fā)布時(shí)間:2017-09-12 20:23

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【摘要】:Larp4b是人類LARP家族中的一員,為廣譜翻譯因子,可結(jié)合RNA并促進(jìn)mRNA的翻譯。前期本實(shí)驗(yàn)室的研究工作提示白血病患者存在Larp4b基因表達(dá)變化。本研究檢測(cè)Larp4b基因在造血各系細(xì)胞中的表達(dá)量,敲降Larp4b表達(dá)對(duì)Lin-造血細(xì)胞生物行為的影響。利用RT-PCR檢測(cè)Larp4b基因在造血各系細(xì)胞中的表達(dá),用病毒上清感染Lin-細(xì)胞,分選EGFP+細(xì)胞,PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期,AnnexinV-PE/7-AAD雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,并進(jìn)行集落形成實(shí)驗(yàn)(colony forming cell assay,CFC)。結(jié)果表明:Larp4b基因在造血各系細(xì)胞中表達(dá)不同,Larp4b基因在粒系和巨噬祖細(xì)胞(GMP)以及髓細(xì)胞(M)的表達(dá)較高,在T淋巴細(xì)胞中表達(dá)明顯低,抑制Larp4b表達(dá)不影響Lin-造血細(xì)胞體外集落形成能力,不影響Lin-造血細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡。結(jié)論:Larp4b基因在髓系細(xì)胞中表達(dá)較高。抑制Larp4b表達(dá)不影響Lin-造血細(xì)胞集落形成能力,不影響Lin-造血細(xì)胞的增殖,這為后續(xù)Larp4b體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液學(xué)研究所、血液病醫(yī)院 實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】Larpb 造血干/祖細(xì)胞 造血細(xì)胞 慢病毒載體
【基金】:科技部973項(xiàng)目(編號(hào)2012CB966600,2010CB945204,2009CB521803) 國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào)81090414,81130074,81070390) 天津科委基金(編號(hào)10JCZDJC19500,11JCZDJC27900)
【分類號(hào)】:R329.28
【正文快照】: La相關(guān)蛋白(La-related protein,LARP)是一類在進(jìn)化中高度保守的RNA轉(zhuǎn)錄酶,可介導(dǎo)RNA po-ly-merase III(Pol III)初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3'端尿嘧啶富集區(qū)與核糖體的結(jié)合,使其不被核酸外切酶降解,進(jìn)而參與mRNA的代謝[1]。Larp4b是LARP家族成員之一,可通過與多聚核糖體作用參與mRNA的

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