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  更多相關(guān)文章： 成年大鼠心肌細胞 缺血再灌注 胰島素抵抗 過氧化物酶體增殖物激活受體 轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的觀察小干擾RNA(siRNA)沉默過氧化物酶體增殖物激活受體基因(PPARγ)的表達對成年大鼠缺血再灌注損傷(IRI)心肌細胞胰島素抵抗的影響。方法培養(yǎng)成年大鼠心肌細胞,構(gòu)建沉默大鼠心肌細胞PPARγ基因特異siRNA,以脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染離體培養(yǎng)的大鼠心肌細胞。制備心肌細胞IRI模型。采用RT-PCR檢測PPARγ和葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT-4)mRNA表達,Western blot檢測PPARγ蛋白表達;同位素示蹤法檢測細胞葡萄糖(Glu)攝取率變化。結(jié)果 IRI模型組心肌細胞PPARγmRNA及蛋白表達較空白組不同程度增加(P均0.05);siRNA-PPARγ組,PPARγmRNA及蛋白表達量較空載體組和IRI模型組明顯下降(P0.01),空載體組PPARγmRNA及蛋白表達接近IRI模型組水平;GLUT-4mRNA表達量空白組各時間點無明顯差別,IRI模型組0min表達量明顯降低,之后隨著再灌注時間增加逐漸恢復(fù)至空白組水平,空載體組GLUT-4mRNA表達與IRI模型組無明顯差別;沉默PPARγ后,細胞GLUT-4mRNA表達較IRI模型組和空載體組減低更明顯(P0.05),恢復(fù)較IRI模型組更慢。在胰島素刺激下,與IRI模型組比較,siRNA-PPARγ組各時間點Glu攝取率均降低(P0.05),0min下降49.78%,15min、1h、2h分別降低38.94%、18.61%、11.54%,6h開始恢復(fù)至IRI模型組水平。空載體組與模型組比較Glu攝取率無明顯差異。結(jié)論沉默PPARγ的表達,可加重IRI心肌細胞胰島素抵抗,其可能的機制是PPARγ基因沉默導(dǎo)致的GLUT-4mRNA表達下降或轉(zhuǎn)位障礙。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胸心血管外科;遵義醫(yī)學(xué)院藥理實驗室;遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院麻醉科;
【關(guān)鍵詞】： 成年大鼠心肌細胞 缺血再灌注 胰島素抵抗 過氧化物酶體增殖物激活受體 轉(zhuǎn)染
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.30960382) 貴州省科技攻關(guān)項目(No.2007-1032) 貴州省高層次人才科研特助項目(No.TZJF-2008-61)
【分類號】：R363
【正文快照】： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferators activated receptor gamma,PPARγ)屬于核內(nèi)激素受體基因轉(zhuǎn)錄子,主要參與葡萄糖、脂肪代謝及增強胰島素敏感性。研究發(fā)現(xiàn),PPARγ是減輕或阻止心肌缺血再灌注損傷(ischemiareperfusion injury,IRI)的一個新的基因治療靶

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