本文關鍵詞：以半乳糖作為生長能源的HepG2細胞線粒體毒性評價模型的建立與應用

  更多相關文章： 線粒體毒性 HepG細胞 核苷類似物 半乳糖 線粒體抑制劑 Crabtree effect ATP

【摘要】：目的針對藥源性肝臟線粒體毒性問題,利用人肝癌HepG2細胞分別建立以葡萄糖和半乳糖作為生長能源的線粒體毒性評價模型,并初步應用于核苷類似物藥物線粒體毒性的評價。方法采用半乳糖替換葡萄糖作為HepG2細胞生長的能量來源,通過對半乳糖濃度及作用時間的優(yōu)化,建立線粒體毒性評價模型,并用線粒體抑制劑進行驗證,進而評價核苷類似物的線粒體毒性。結果 (1)線粒體抑制劑作用24 h結果顯示:葡萄糖模型中,魚藤酮、寡霉素、CCCP濃度分別在1、10、1μmol·L-1即可見明顯的線粒體毒性,而在半乳糖模型中3者均在1 nmol·L-1時已表現(xiàn)出明顯的線粒體毒性,抑制率分別為81.8%(P0.01)、46.4%(P0.01)、20.0%(P0.05);相比之下,作用48 h,3者在半乳糖細胞模型中的線粒體功能抑制率比葡萄糖模型中更顯著。(2)核苷類似物在葡萄糖模型中未見明顯的線粒體毒性。而在半乳糖模型中,藥物作用24 h,10μmol·L-1更昔洛韋、噴昔洛韋、阿昔洛韋即表現(xiàn)出明顯的線粒體毒性,抑制率分別達7.5%(P0.05)、6.9%(P0.05)、8.2%(P0.05),100μmol·L-1的抑制率更高;藥物作用48 h,上述藥物的線粒體功能抑制率更高。結論以半乳糖替代葡萄糖作為細胞生長碳源時,可避免細胞Crabtree effect效應,使得線粒體毒性物質(zhì)作用細胞后線粒體損傷更易顯現(xiàn),尤其對于線粒體低毒的化合物而言,利用半乳糖作為細胞生長碳源使其線粒體毒性更易評價。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;天津藥物研究院新藥設計與發(fā)現(xiàn)重點實驗室;
【關鍵詞】： 線粒體毒性 HepG細胞 核苷類似物 半乳糖 線粒體抑制劑 Crabtree effect ATP
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(No2012ZX09105102,2011ZX09401-009)
【分類號】：R329.24
【正文快照】： 線粒體是細胞內(nèi)重要的細胞器之一,它除了通過電子傳遞鏈和氧化磷酸化系統(tǒng)產(chǎn)生ATP供給細胞所需能量外,在細胞氧化還原狀態(tài)、滲透壓調(diào)節(jié)、細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)、活性氧生成以及細胞信號轉(zhuǎn)導中都起著非常重要的作用。線粒體在對能量需求量大、代謝旺盛的器官組織如腦、心臟、肝臟、腎臟

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