發(fā)布時(shí)間：2017-09-11 22:06

  本文關(guān)鍵詞：以半乳糖作為生長能源的HepG2細(xì)胞線粒體毒性評(píng)價(jià)模型的建立與應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 線粒體毒性 HepG細(xì)胞 核苷類似物 半乳糖 線粒體抑制劑 Crabtree effect ATP

【摘要】：目的針對(duì)藥源性肝臟線粒體毒性問題,利用人肝癌HepG2細(xì)胞分別建立以葡萄糖和半乳糖作為生長能源的線粒體毒性評(píng)價(jià)模型,并初步應(yīng)用于核苷類似物藥物線粒體毒性的評(píng)價(jià)。方法采用半乳糖替換葡萄糖作為HepG2細(xì)胞生長的能量來源,通過對(duì)半乳糖濃度及作用時(shí)間的優(yōu)化,建立線粒體毒性評(píng)價(jià)模型,并用線粒體抑制劑進(jìn)行驗(yàn)證,進(jìn)而評(píng)價(jià)核苷類似物的線粒體毒性。結(jié)果 (1)線粒體抑制劑作用24 h結(jié)果顯示:葡萄糖模型中,魚藤酮、寡霉素、CCCP濃度分別在1、10、1μmol·L-1即可見明顯的線粒體毒性,而在半乳糖模型中3者均在1 nmol·L-1時(shí)已表現(xiàn)出明顯的線粒體毒性,抑制率分別為81.8%(P0.01)、46.4%(P0.01)、20.0%(P0.05);相比之下,作用48 h,3者在半乳糖細(xì)胞模型中的線粒體功能抑制率比葡萄糖模型中更顯著。(2)核苷類似物在葡萄糖模型中未見明顯的線粒體毒性。而在半乳糖模型中,藥物作用24 h,10μmol·L-1更昔洛韋、噴昔洛韋、阿昔洛韋即表現(xiàn)出明顯的線粒體毒性,抑制率分別達(dá)7.5%(P0.05)、6.9%(P0.05)、8.2%(P0.05),100μmol·L-1的抑制率更高;藥物作用48 h,上述藥物的線粒體功能抑制率更高。結(jié)論以半乳糖替代葡萄糖作為細(xì)胞生長碳源時(shí),可避免細(xì)胞Crabtree effect效應(yīng),使得線粒體毒性物質(zhì)作用細(xì)胞后線粒體損傷更易顯現(xiàn),尤其對(duì)于線粒體低毒的化合物而言,利用半乳糖作為細(xì)胞生長碳源使其線粒體毒性更易評(píng)價(jià)。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;天津藥物研究院新藥設(shè)計(jì)與發(fā)現(xiàn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 線粒體毒性 HepG細(xì)胞 核苷類似物 半乳糖 線粒體抑制劑 Crabtree effect ATP
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(No2012ZX09105102,2011ZX09401-009)
【分類號(hào)】：R329.24
【正文快照】： 線粒體是細(xì)胞內(nèi)重要的細(xì)胞器之一,它除了通過電子傳遞鏈和氧化磷酸化系統(tǒng)產(chǎn)生ATP供給細(xì)胞所需能量外,在細(xì)胞氧化還原狀態(tài)、滲透壓調(diào)節(jié)、細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)、活性氧生成以及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中都起著非常重要的作用。線粒體在對(duì)能量需求量大、代謝旺盛的器官組織如腦、心臟、肝臟、腎臟

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