本文關(guān)鍵詞：Noxa基因的克隆及其誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的研究

  更多相關(guān)文章： Noxa 克隆 真核表達(dá) 凋亡

【摘要】：目的克隆人Noxa基因,構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA-Noxa,將重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa轉(zhuǎn)染人肺癌A549細(xì)胞株,并觀察重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的作用。方法使用RT-PCR的方法擴(kuò)增出Noxa基因,克隆至真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA(-),構(gòu)建出重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa。將重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa轉(zhuǎn)染人肺癌A549細(xì)胞株,使用Western blot的方法檢測(cè)Noxa基因的過(guò)表達(dá);使用Hoechst 33258染色,觀察A549細(xì)胞的凋亡;使用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力。結(jié)果經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定,重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa構(gòu)建成功。Western blot檢測(cè)出Noxa基因的過(guò)表達(dá);Hoechst 33258染色和MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):重組質(zhì)粒pcDNA-Noxa能明顯誘導(dǎo)A549細(xì)胞出現(xiàn)凋亡現(xiàn)象。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)初步探索了Noxa基因的促凋亡作用,為以后進(jìn)一步深入研究Noxa基因的促凋亡功能基礎(chǔ)。
【作者單位】： 成都醫(yī)學(xué)院;湖北醫(yī)藥學(xué)院
【關(guān)鍵詞】： Noxa 克隆 真核表達(dá) 凋亡
【基金】：四川省教育廳面上項(xiàng)目(No.11ZB170) 四川省衛(wèi)生廳科研課題(No.120489) 成都醫(yī)學(xué)院�；�(No.CYZ10-004,No.CYZ11-0059) 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目(No.CYXK2012005)資助
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 以手術(shù)、化療和放療為基礎(chǔ)的綜合治療是目前最主要的治療腫瘤的方式。雖然這些傳統(tǒng)的治療方法已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展,但達(dá)到的效果有限。目前有些常見(jiàn)的腫瘤如肺癌的5年生存期僅為12%、胃癌約23%、卵巢癌約40%[1],所以人們開(kāi)始尋求新的治療手段,而選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡便成

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 施一公;孫兵法;;細(xì)胞凋亡的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2010年03期

2 張明;辛?xí)匝?李紅梅;宋暉;;hTERT啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的TRAIL誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞的凋亡作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 曹康;林超;戴謙;李磊;雷庭鈞;謝意;湯明海;袁鑄;;人凋亡相關(guān)新基因PNAS-4的克隆、原核表達(dá)與純化[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年04期

2 劉忠昌;賈永森;包巨太;;通幽湯及其拆方對(duì)食管鱗癌細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)理研究[J];江蘇中醫(yī)藥;2011年07期

3 田力;李偉偉;李鵬飛;張蕾;;人端粒酶啟動(dòng)子(hTERTp)真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年06期

4 賈永森;李繼安;韓炳生;;從證候分子本質(zhì)論食管癌血瘀病機(jī)[J];遼寧中醫(yī)雜志;2012年08期

5 劉鐳;張真真;;實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)溶酶體光損傷誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過(guò)程中Bax定位的時(shí)空變化[J];激光生物學(xué)報(bào);2013年03期

6 袁鑄;嚴(yán)飛;趙新宇;鄧洪新;李炯;;小鼠凋亡相關(guān)新基因PNAS-4真核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)及體外抗腫瘤作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年12期

7 張寬;許信剛;童德文;丁麗;李兆才;李偉;;牛皰疹病毒Ⅰ型誘導(dǎo)MDBK細(xì)胞凋亡的初步研究[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年12期

8 張蕾;田力;李偉偉;李鵬飛;;端粒酶啟動(dòng)子突變對(duì)EGFP啟動(dòng)效率影響[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2010年08期

9 張蕾;金輝;田力;李偉偉;李鵬飛;;人甲狀腺鱗癌細(xì)胞中端粒酶啟動(dòng)子功能分析[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2011年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王建;靶向hTERT的RNA干擾及其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡影響的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

2 李佳;APE1的氧化還原功能在卵巢癌鉑類耐藥中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 吳正三;豬體細(xì)胞核移植相關(guān)影響因素的研究[D];廣西大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 趙丹紅;家蠶BmICE-912基因的克隆與功能研究[D];西南大學(xué);2011年

2 張曦;NF-κB、Bc1-2、TGF-β1在酒精性脂肪肝患者血清中的表達(dá)及相關(guān)性[D];蘭州大學(xué);2011年

3 王越;肺炎鏈球菌溶血素致腦損傷細(xì)胞凋亡及凋亡誘導(dǎo)因子的表達(dá)及意義[D];鄭州大學(xué);2011年

4 趙燕;BH3 mimetics分子優(yōu)化的量熱學(xué)研究[D];大連理工大學(xué);2013年

5 武煒;RNAi沉默IGF-1R表達(dá)對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)和藥物敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2013年

6 黃玉玲;大黃素衍生物E11對(duì)淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Molt-4及CA46的作用及其機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 宋悅,孔北華,馬道新,劉培淑,江森;宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中hTERT啟動(dòng)子活性的研究[J];腫瘤防治雜志;2003年03期

2 李紅梅;宋天保;于月成;曹云新;王紅英;宋暉;張明;;hTERT基因核心啟動(dòng)子調(diào)控的TRAIL基因表達(dá)載體的構(gòu)建及對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2006年02期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳愛(ài)娟,廖春良;“克隆技術(shù)”與“克隆人”——生物技術(shù)對(duì)人類的挑戰(zhàn)[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版);1999年01期

2 魯蓉,李元建,賀達(dá)仁;克隆的意義及其價(jià)值取向[J];醫(yī)學(xué)與社會(huì);2000年05期

3 劉亞偉;戴兵;蔡厚安;梅長(zhǎng)林;;AnnexinⅡ基因克隆及真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];生物學(xué)雜志;2006年03期

4 姬可平;克隆羊與克隆人的生物遺傳與倫理[J];中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志;1997年02期

5 黃敏;歐東梅;趙霞;徐金環(huán);張曉梅;周劍峰;張義成;;人Gfi1基因克隆及重組Gfi1慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年06期

6 奇云;克隆人向我們走來(lái)——人體胚胎克隆研究的新進(jìn)展(一)[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2000年12期

7 ;讓昨天告訴今天:干細(xì)胞多能性相關(guān)研究的學(xué)術(shù)與技術(shù)進(jìn)展[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年23期

8 王雪松;李永哲;劉國(guó)振;;自身抗原核點(diǎn)蛋白Sp100基因克隆和真核表達(dá)[J];世界華人消化雜志;2006年08期

9 李進(jìn);劉妍;張玲霞;;乙型肝炎病毒X蛋白的功能研究進(jìn)展[J];人民軍醫(yī);2006年04期

10 曹智;馬駿;袁文俊;林麗;;熱休克蛋白60與細(xì)胞凋亡[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2008年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 肖樂(lè);黨永明;時(shí)德;;含人C型利鈉肽基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用[A];第四屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

2 陳建忠;朱海紅;陳智;劉克洲;;小鼠TLR3真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其活性初步鑒定[A];浙江省免疫學(xué)會(huì)第五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

3 李暉;任小華;鐘森;任紅;;結(jié)核分支桿菌含信號(hào)肽的mtb8.4基因的克隆及真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建[A];中國(guó)防癆雜志2003第25卷增刊——2003年中國(guó)防癆協(xié)會(huì)全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

4 王曉東;林鐲;張友才;陳永平;許爛漫;陳國(guó)榮;鞏躍文;;大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子與肝再生增強(qiáng)因子融合基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

5 林綺萍;吳少庭;翁亞彪;袁仕善;高世同;秦莉;雷明軍;潘暉榕;張仁利;黃達(dá)娜;溫見(jiàn)翔;;SARS病毒N蛋白真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答[A];全國(guó)新出現(xiàn)傳染病學(xué)術(shù)研討會(huì)資料匯編[C];2004年

6 李丹莉;張昌菊;柳長(zhǎng)柏;;pIRES-CRT/E2-SLC真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建、表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[A];第十屆全國(guó)生化與分子藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2007年

7 蔣玉鳳;;結(jié)核分支桿菌抗原ESAT-6基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及蛋白表達(dá)的鑒定[A];中國(guó)防癆雜志2003第25卷增刊——2003年中國(guó)防癆協(xié)會(huì)全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

8 黃達(dá)娜;吳少庭;袁仕善;張仁利;高世同;龍彩虹;林琦萍;雷明軍;潘暉榕;;弓形蟲(chóng)SAG1真核表達(dá)質(zhì)粒的體外表達(dá)及其誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答[A];全國(guó)新出現(xiàn)傳染病學(xué)術(shù)研討會(huì)資料匯編[C];2004年

9 袁仕善;吳少庭;黃達(dá)娜;張仁利;高世同;余新炳;;弓形蟲(chóng)GRA8真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與體外表達(dá)[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

10 李建遠(yuǎn);;IL-2-preS融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒的基因槍注射DNA免疫研究[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊(cè)）[C];2001年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本報(bào)記者 李恩青;克隆人胚橫空出世 克隆療法有戲沒(méi)戲[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年

2 倪永華;克隆人之門能不能關(guān)上[N];科技日?qǐng)?bào);2004年

3 ;生物醫(yī)學(xué)大盤點(diǎn)（上）[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

4 聶翠蓉;克隆嬰兒不安全非人道[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

5 毛磊;人類胚胎干細(xì)胞首次克隆成功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

6 記者 任海軍;美公助干細(xì)胞研究,嚴(yán)防“克隆人”[N];新華每日電訊;2009年

7 張?zhí)锟?’2002生物醫(yī)學(xué)大盤點(diǎn)（下）[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

8 高沖;克隆器官何時(shí)造福人類[N];中國(guó)稅務(wù)報(bào);2001年

9 曲笑;美國(guó)將規(guī)范干細(xì)胞研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

10 本報(bào)記者 白毅;胚胎干細(xì)胞讓人歡喜讓人憂[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張國(guó)際;副粘病毒Tianjin株HN和F基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)幼鼠免疫效果的評(píng)價(jià)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

2 許熊飛;調(diào)節(jié)性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)CD4~+T細(xì)胞凋亡及促進(jìn)記憶性CD4~+T細(xì)胞產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

3 張守純;p16真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2004年

4 徐冰;骨髓間質(zhì)干細(xì)胞對(duì)1-甲基4-苯基吡啶離子誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

5 邵圣文;丙型肝炎病毒F蛋白抗原性、抗凋亡作用及細(xì)胞內(nèi)磷酸化研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 張業(yè);抑癌基因產(chǎn)物p53在熱休克蛋白基因表達(dá)調(diào)控中的作用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

7 黃河;Flt3配體基因的克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定[D];吉林大學(xué);2006年

8 徐金華;HSV-2多表位復(fù)合DNA疫苗的構(gòu)建與誘導(dǎo)小鼠免疫效果的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

9 華瑞;體內(nèi)增強(qiáng)治療性乙型肝炎核酸疫苗免疫應(yīng)答的研究[D];吉林大學(xué);2006年

10 陳佳玉;丙型肝炎治療性DNA疫苗的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 譚潔瓊;SARS-CoV S1蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞的表達(dá)和純化[D];南華大學(xué);2005年

2 康春雨;人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2真核表達(dá)質(zhì)粒的制備、轉(zhuǎn)染及表達(dá)[D];東南大學(xué);2005年

3 王耀晟;表達(dá)hVEGF_（121）/EGFP的間充質(zhì)干細(xì)胞制備及缺氧對(duì)其表達(dá)影響[D];南昌大學(xué);2007年

4 張國(guó)英;RNA干擾對(duì)HepG2細(xì)胞AFP基因表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 唐文琴;人生長(zhǎng)激素受體的定點(diǎn)突變及其真核表達(dá)[D];江西師范大學(xué);2007年

6 胡國(guó)勇;17β-雌二醇對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞凋亡的影響[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2009年

7 胡艷;髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[D];浙江大學(xué);2011年

8 雷建園;真核表達(dá)質(zhì)粒pSG5-Oct4的構(gòu)建及瞬時(shí)表達(dá)的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

9 吳漢霞;真核表達(dá)質(zhì)粒PIRES-Ag85B的構(gòu)建及其在CHO細(xì)胞中的表達(dá)[D];安徽理工大學(xué);2011年

10 楊碩;pcDNA3/PD-L1及pcDNA3/B7.1真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及免疫作用的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：829124