本文關(guān)鍵詞：抗心型脂肪酸結(jié)合蛋白單克隆抗體制備、鑒定和在側(cè)向免疫層析方法中的應(yīng)用

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【摘要】：目的:制備抗心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)單克隆抗體(mAb),并建立側(cè)向免疫層析方法檢測血漿中H-FABP。方法:用H-FABP蛋白免疫純系Balb/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)建立能穩(wěn)定分泌抗人H-FABP的單克隆雜交瘤細胞株。常規(guī)制備腹水,純化后得到特異性抗H-FABP單克隆抗體,進行效價、特異性、親和力的鑒定分析,并在ELISA平臺進行抗體配對,用所篩選到的抗體對初步建立了檢測H-FABP的側(cè)向免疫層析方法。結(jié)果:成功獲得12株穩(wěn)定分泌抗體的陽性細胞株,并篩選出能相互配對,并應(yīng)用于側(cè)向免疫層析平臺的抗體3D1和5F4,檢測臨床樣品與對照試劑比較總符合率為100%。結(jié)論:篩選能穩(wěn)定分泌抗體的細胞株,配對抗體應(yīng)用于側(cè)向免疫層析檢測方法中,能快速、特異、靈敏的檢測出臨床樣品中H-FABP,為臨床應(yīng)用快速檢測H-FABP指標提供了方法和關(guān)鍵材料。
【作者單位】： 華南理工大學生物科學與工程學院;自檢型快速診斷國家地方聯(lián)合工程實驗室廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】： H-FABP 單克隆抗體 POCT 免疫層析
【基金】：衛(wèi)生部《重組蛋白和抗體庫研制平臺》資助項目(2011ZX09506-001)
【分類號】：R392
【正文快照】： 自R.K.Ockner等人1972年發(fā)現(xiàn)脂肪酸結(jié)合蛋白以來,人們陸續(xù)分離并鑒定了9種不同類型的脂肪酸結(jié)合蛋白[1-2],不同型FABP的氨基酸序列的同源性為38%～70%。H-FABP是一種可溶性蛋白,分子量為14～15kDa,大量存在于心肌細胞質(zhì)中,占胞質(zhì)蛋白的15%[3-5]。正常狀況下,血液中不含或僅含

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4 杜雪梅;唐麗;任飛W，

本文編號：828331