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吞噬凋亡淋巴細(xì)胞的未成熟樹突細(xì)胞對(duì)脂多糖介導(dǎo)激活的抑制作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-08 00:35

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【摘要】:目的探討吞噬經(jīng)體外光化學(xué)法(PUVA)處理的同種異基因淋巴細(xì)胞的未成熟樹突細(xì)胞(imDC)對(duì)脂多糖(LPS)介導(dǎo)的樹突細(xì)胞(DC)激活的抑制作用。方法分離C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞,經(jīng)小鼠重組白細(xì)胞介素4(rmIL-4)和重組粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rmGM-CSF)共同誘導(dǎo)培養(yǎng)制備骨髓來源的C57BL/6小鼠imDC。分離BALB/c小鼠脾淋巴細(xì)胞(SP),經(jīng)PUVA處理制備成PUVA-SP。在體外將BALB/c小鼠的PUVA-SP與C57BL/6小鼠骨髓來源的imDC共同培養(yǎng),獲得PUVA-SP DCs。在上述imDC和PUVA-SP DCs中分別加入10ng/ml LPS刺激24h,獲得LPS DCs。采用ELISA法檢測(cè)上清中IL-10和IL-12的濃度,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面MHC-Ⅱ、CD40、CD86和CD80的表達(dá)水平。結(jié)果 LPS刺激后,PUVA-SP DCs表面分子CD80、CD86、CD40的表達(dá)分別為21.26%、38.50%和39.78%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于imDC經(jīng)LPS刺激后的表達(dá)(50.58%、66.29%、71.20%,P0.01)。LPS刺激后PUVA-SP DCs和imDCs MHC-Ⅱ的表達(dá)分別為67.29%和68.64%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。LPS刺激后,PUVA-SP DCs和imDCs分泌IL-10的水平分別為435.6±13.9pg/ml和132.6±2.8pg/ml,與刺激前相比均增高,但前者增高的水平要顯著高于后者(P0.01)。LPS刺激后,imDCs分泌高水平的IL-12,其p70和p40的表達(dá)量分別為192.1±5.9和999.8±26.9pg/ml,而PUVA-SP DCs分泌IL-12的水平分別為p7018.56±1.3pg/ml,p40 15.22±1.2pg/ml,顯著低于imDCs,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論 PUVA-SP DCs雖然表達(dá)不成熟表型,但其功能不同于imDC,對(duì)LPS刺激具有抑制作用,適用于誘導(dǎo)體內(nèi)免疫耐受。
【作者單位】: 解放軍309醫(yī)院全軍器官移植研究所器官移植與免疫調(diào)節(jié)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】樹突細(xì)胞 免疫耐受 脂多糖類
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金(81102242) 北京市科技專項(xiàng)2011階梯計(jì)劃(Z111102055311086) 中國(guó)博士后基金(200902680,20080441308)~~
【分類號(hào)】:R392.4
【正文快照】: 樹突細(xì)胞(DC)作為體內(nèi)最有效的抗原呈遞細(xì)胞(APC),不但具有免疫激活作用,而且在一定的成熟狀態(tài)下可誘導(dǎo)免疫耐受。DC的免疫調(diào)節(jié)作用與其發(fā)育成熟狀態(tài)密切相關(guān)[1-3],未成熟DC(imDC)具有免疫負(fù)向調(diào)控作用,但在直接用于誘導(dǎo)移植免疫耐受的過程中,imDC易被刺激成熟,尤其是在體內(nèi)

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