穩(wěn)定表達Trop-2基因的NIH3T3細胞系的構(gòu)建和特性分析
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【摘要】:目的:建立穩(wěn)定表達人滋養(yǎng)層細胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3細胞,分析過表達Trop-2對NIH3T3細胞的生長、增殖和侵襲特性的影響。方法:將Trop-2基因克隆到真核表達載體pcDNA3.1,轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞,通過G418篩選及RT-PCR鑒定獲得穩(wěn)定表達Trop-2的NIH3T3細胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法檢測NIH3T3-Trop-2細胞的增殖能力,軟瓊脂集落形成實驗檢測NIH3T3-Trop-2細胞的克隆形成能力,明膠酶譜法檢測NIH3T3-Trop-2細胞的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及細胞劃痕實驗檢測NIH3T3-Trop-2細胞的遷移能力。結(jié)果:穩(wěn)定表達Trop-2的NIH3T3細胞在生長增殖、克隆形成及侵襲能力均較NIH3T3細胞強,細胞培養(yǎng)上清中的MMP-2和MMP-9增多。結(jié)論:Trop-2對細胞的增殖與遷移能力具有明顯的促進作用。
【作者單位】: 南京軍區(qū)軍事醫(yī)學(xué)研究所;南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部抗體技術(shù)重點實驗室;江蘇省血液中心;
【關(guān)鍵詞】: Trop- NIHT 真核表達 增殖與遷移
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助(81101704) 南京市科技局(201201090)
【分類號】:R341
【正文快照】: 人滋養(yǎng)層細胞表面抗原(human trophoblast cellsurface antigen,Trop-2),又稱GA733-1,EP1,M1S1,TACSTD2,是一種細胞表面糖蛋白。Trop-2在早期胚胎發(fā)育的胎盤滋養(yǎng)層細胞表面,在正常人體細胞組織很少表達,但在人滋養(yǎng)層細胞和上皮細胞癌組織中(包括乳腺癌、直腸癌、肺癌和前列腺
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本文編號:807725
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