本文關(guān)鍵詞：弓形蟲actin蛋白多克隆抗體的制備及純化

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【摘要】：目的制備弓形蟲肌動(dòng)蛋白(actin)的多克隆抗體并純化。方法以弓形蟲cDNA鏈為模板PCR擴(kuò)增1 131bp actin基因,亞克隆至pET30a載體后轉(zhuǎn)化入大腸埃希菌BL21中,用1mmol/L IPTG誘導(dǎo)表達(dá)actin-His6蛋白,采用親和層析法純化;取200μg純化蛋白加等量佐劑混合,免疫SD大鼠4次,收集抗血清,用親和純化柱純化。結(jié)果 PCR擴(kuò)增出actin基因并成功構(gòu)建actin/pET30a/BL21表達(dá)系統(tǒng),獲得actin-His6蛋白,制備的大鼠源性actin-His6蛋白多克隆抗體純化后為單一蛋白抗體。結(jié)論制備并純化了抗弓形蟲actin的多克隆抗體,為弓形蟲入侵機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 肌動(dòng)蛋白 多克隆抗體
【基金】：河南省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(No.112102310209) 河南省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目(No.2012B310019) 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(2010)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 弓形蟲(Toxoplasma gondii)可主動(dòng)入侵多種動(dòng)物和人的有核細(xì)胞,導(dǎo)致人獸共患弓形蟲病,給人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展造成不可估量的損失。現(xiàn)有研究結(jié)果表明弓形蟲的菱形體蛋白(rhomboids,ROMs)、肌動(dòng)蛋白(actin)和微線體蛋白(microneme proteins,MICs)等多個(gè)分子參與入侵過程[1～4]

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本文編號(hào)：802331