發(fā)布時間：2017-09-05 14:08

  本文關(guān)鍵詞：RhoA蛋白對結(jié)核桿菌侵襲A549細(xì)胞的影響

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【摘要】：探討結(jié)核桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)侵襲A549細(xì)胞過程中RhoA蛋白功能。構(gòu)建靶向RhoA基因的小干擾RNA(siRNA)表達(dá)載體si-RhoA,轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,36 h后進(jìn)行MTB黏附和侵襲細(xì)胞實(shí)驗(yàn),蛋白印跡法(Western blot)檢測RhoA蛋白表達(dá)水平,電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變,激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞微絲骨架變化并計算F-actin重排指數(shù),定量PCR法測量細(xì)胞黏附和內(nèi)吞的MTB數(shù)量。結(jié)果顯示,si-RhoA轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞后,RhoA蛋白表達(dá)下降84.7%,細(xì)胞對MTB的黏附能力未改變。MTB侵襲細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示,si-RhoA轉(zhuǎn)染組細(xì)胞F-actin重排指數(shù)和內(nèi)吞細(xì)菌數(shù)量分別是(63.0±3.1)%和(3.19±0.26)×103拷貝,無關(guān)siRNA組分別是(84.5±1.8)%和(4.45±0.29)×103拷貝,前者均少于后者(P0.01)。由此可見,結(jié)核桿菌侵襲A549細(xì)胞需要RhoA蛋白參與,可能通過"拉鏈"機(jī)制介導(dǎo)結(jié)核桿菌侵襲非吞噬細(xì)胞。
【作者單位】： 湖州師范學(xué)院醫(yī)學(xué)院創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室;南京軍區(qū)南京總醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核桿菌 侵襲 RhoA基因 A細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號:30800988)資助的課題~~
【分類號】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病由結(jié)核桿菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)引起。全球1/3人口受到過結(jié)核桿菌感染,約150萬人死于結(jié)核病[1]。更為嚴(yán)峻的是,臨床上出現(xiàn)的多耐藥(multi-drug resistant,MDR)、泛耐藥(exten-sively drug resistant,XDR)乃至全耐藥(totally drugresistant,TDR)結(jié)核桿菌菌

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本文編號：798418