發(fā)布時間：2017-09-02 03:03

  本文關(guān)鍵詞：大鼠比目魚肌梭內(nèi)肌纖維的分離方法

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【摘要】：梭囊的存在限制了人們對肌梭功能及其機(jī)制的深入研究,本研究旨在建立將梭內(nèi)肌纖維從梭囊中分離出來的方法。應(yīng)用混合酶液消化的方法,分離大鼠比目魚肌的梭內(nèi)肌纖維,使用不同的培養(yǎng)基溶液進(jìn)行培養(yǎng),用臺盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞活性,用膜片鉗技術(shù)檢測靜息膜電位。結(jié)果顯示,氨基酸-生理鹽溶液中梭內(nèi)肌纖維幾乎全部壞死,DMEM培養(yǎng)基雖能較好地維持細(xì)胞狀態(tài),但是對CO2含量要求較高,而Leiboviz’s 15(L-15)培養(yǎng)基能夠維持梭內(nèi)肌纖維的正常形態(tài)和功能達(dá)1～2h;和常規(guī)處理過的蓋玻片相比,用明膠-多聚賴氨酸-血清處理過的蓋玻片上梭內(nèi)肌纖維更易貼壁;分離出的梭內(nèi)肌纖維靜息膜電位為(45.3±5.1)mV,顯示纖維的功能狀態(tài)良好,能夠滿足電生理實驗的要求。本研究為進(jìn)一步研究梭內(nèi)肌纖維的功能及其機(jī)制奠定了良好的方法學(xué)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院機(jī)能學(xué)部;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理教研室;南昆士蘭大學(xué)生物和物理科學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： 肌梭 梭內(nèi)肌纖維 靜息膜電位
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30901583) the Natural Science Foundation of Hubei Province of China(No.2012FFC05601)
【分類號】：R338
【正文快照】： 肌梭是骨骼肌中的重要感受器,其表面由結(jié)締組織形成被囊,內(nèi)含有3~16條較細(xì)的梭內(nèi)肌纖維。長期以來,許多學(xué)者利用電生理學(xué)、生物化學(xué)、組織化學(xué)等多種方法,對肌梭的發(fā)育、形態(tài)結(jié)構(gòu)及其462生理學(xué)報Acta Physiologica Sinica,August25,2013,65(4):461 465種酶溶于生理鹽溶液或

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