本文關(guān)鍵詞：β2-spectrin的siRNA對AML-12肝細(xì)胞增殖特性的影響

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【摘要】：目的應(yīng)用特異性siRNA干擾小鼠肝細(xì)胞株AML-12中β2-spectrin表達(dá),檢測AML-12細(xì)胞增殖凋亡以及細(xì)胞周期的改變。方法化學(xué)合成β2-spectrin特異性siRNA,分別轉(zhuǎn)染AML-12細(xì)胞,熒光定量PCR和Western blot確定其抑制效果。AML-12細(xì)胞經(jīng)TGF-β細(xì)胞因子處理4h后,轉(zhuǎn)染β2-spectrin特異性siRNA,48h后,BrdU標(biāo)記法以及流式細(xì)胞術(shù)檢測β2-spectrin沉默前后AML-12細(xì)胞增殖、凋亡以及周期變化;共聚焦技術(shù)檢測干擾β2-spectrin表達(dá)對TGF-β/Smad信號通路中Smad3、Smad4核定位的影響。結(jié)果 siRNA可以高效特異沉默β2-spectrin的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示,β2-spectrin沉默促進(jìn)AML-12細(xì)胞增殖,抑制凋亡,S期細(xì)胞比例顯著升高。免疫熒光結(jié)果顯示,TGF-β處理后,Smad3、Smad4表達(dá)定位于細(xì)胞核,沉默β2-spectrin干擾Smad3、Smad4細(xì)胞核內(nèi)定位。結(jié)論沉默β2-spectrin的表達(dá)促進(jìn)AML-12增殖,抑制凋亡,促進(jìn)細(xì)胞向S期轉(zhuǎn)化。其機(jī)制可能是通過干擾Smad3、Smad4核定位而抑制TGF-β/Smad信號通路,進(jìn)而發(fā)揮誘導(dǎo)凋亡效應(yīng)。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院消化內(nèi)科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院消化內(nèi)科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院血液內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： β-spectrin AML-細(xì)胞株 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30600277)
【分類號】：R363
【正文快照】： β2-spectrin又名胚肝血影蛋白(embryonic liverfodrin,ELF),最早由Mishra等[1]在胚胎小鼠肝臟中發(fā)現(xiàn)并鑒定,其位于小鼠11號染色體D11XRF到D11BIR6區(qū)之間。β2-spectrin是β血影蛋白家族的成員之一,它對于維持細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞極性,以及細(xì)胞膜上不同功能區(qū)域的形成有著重要的作

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李生偉;甘霖;王一如;劉長安;龔建平;李鉞;李友偉;;TIMP-3對內(nèi)皮細(xì)胞增殖抑制作用的研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

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本文編號：774076