本文關鍵詞：聚乙二醇修飾重組溶葡球菌酶的初步研究

  更多相關文章： 聚乙二醇 重組溶葡球菌酶 純化 單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺丙酸酯

【摘要】：目的:探討聚乙二醇(PEG)修飾重組溶葡球菌酶(lysostaphin)的反應條件以及修飾后產(chǎn)物的純化方法。方法:采用超聲波細胞粉碎機進行菌體破碎,陽離子交換層析、疏水層析進行蛋白純化;在不同條件下,將活化的單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺丙酸酯(mPEG-SPA)與純化后的lysostaphin反應,以單個PEG-Lysostaphin的比例為指標,用SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS方法確定其在修飾產(chǎn)物中的所占比例;采用Sephacryl S-200分子篩凝膠層析法對修飾產(chǎn)物進行分離純化。結(jié)果:mPEG-SPA修飾lysostaphin的反應條件為pH 8.0,溫度4℃,lysostaphin與mPEG-SPA的質(zhì)量比為1∶5,反應時間2.0h;反應產(chǎn)物經(jīng)一步Sephacryl S-200分子篩凝膠層析純化后,初步實現(xiàn)分離。結(jié)論:初步確定了聚乙二醇修飾lysostaphin的反應條件及修飾產(chǎn)物的純化方法。
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學生物工程學院;杭州北斗生物技術有限公司;
【關鍵詞】： 聚乙二醇 重組溶葡球菌酶 純化 單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺丙酸酯
【分類號】：R378
【正文快照】： 溶葡球菌酶(lysostaphin)由Schindler等[1]于1964年首次從一株編號為NRRL B-2628的模仿葡萄球菌(Staphylococcus simulans)培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)并分離。此酶為246個氨基酸組成的單鏈分子,分子量27kDa,等電點PI介于10.4～11.4之間,其中鋅為必須的輔助因子[2-4]。它能特異性水解細菌細

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 吳宏;房偉;袁t，

本文編號：765854