發(fā)布時間：2017-08-31 09:08

  本文關鍵詞：GST-HDAC4融合蛋白載體的構建及其蛋白表達

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【摘要】：目的構建人HDAC4蛋白與谷胱甘肽轉移酶(GST)重組的融合蛋白原核表達載體并進行表達和純化。方法用EcoRI單酶切pcDNA3.1-HDAC4質粒,得到hHDAC4全長編碼序列,并將其克隆至原核表達載體pGEX-5X-1構建成新載體GST-HDAC4,經鑒定完全正確后轉化大腸埃希菌BL21,通過異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)誘導表達,并純化獲得目的蛋白。Western blot檢測重組質粒的表達。結果酶切鑒定和測序結果顯示,GST-HDAC4融合蛋白原核表達載體構建成功�？捡R斯亮藍染色和Western blot結果顯示,成功獲得有生物活性的GST-HDAC4融合蛋白。結論成功構建了HDAC4原核表達載體,獲得有生物活性的GST-HDAC4蛋白。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院細胞生物學教研室 教育部醫(yī)學細胞生物學重點實驗室;
【關鍵詞】： GST-HDAC 原核表達 融合蛋白
【基金】：國家自然科學基金資助項目(30900752,31271389)
【分類號】：R341
【正文快照】： Construction of GST-HDAC4 Fusion Protein Vector and Its Protein Expression組蛋白去乙�；�(histonedeacetylases,HDACs)是真核細胞中的一類重要蛋白酶,參與染色質的結構修飾和基因表達調控,在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用[1]。通過組蛋白去乙�；敢种苿�(his-tone de

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本文編號：764688