本文關(guān)鍵詞：GST-HDAC4融合蛋白載體的構(gòu)建及其蛋白表達(dá)

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【摘要】：目的構(gòu)建人HDAC4蛋白與谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)重組的融合蛋白原核表達(dá)載體并進(jìn)行表達(dá)和純化。方法用EcoRI單酶切pcDNA3.1-HDAC4質(zhì)粒,得到hHDAC4全長(zhǎng)編碼序列,并將其克隆至原核表達(dá)載體pGEX-5X-1構(gòu)建成新載體GST-HDAC4,經(jīng)鑒定完全正確后轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21,通過(guò)異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá),并純化獲得目的蛋白。Western blot檢測(cè)重組質(zhì)粒的表達(dá)。結(jié)果酶切鑒定和測(cè)序結(jié)果顯示,GST-HDAC4融合蛋白原核表達(dá)載體構(gòu)建成功�？捡R斯亮藍(lán)染色和Western blot結(jié)果顯示,成功獲得有生物活性的GST-HDAC4融合蛋白。結(jié)論成功構(gòu)建了HDAC4原核表達(dá)載體,獲得有生物活性的GST-HDAC4蛋白。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)教研室 教育部醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： GST-HDAC 原核表達(dá) 融合蛋白
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30900752,31271389)
【分類號(hào)】：R341
【正文快照】： Construction of GST-HDAC4 Fusion Protein Vector and Its Protein Expression組蛋白去乙�；�(histonedeacetylases,HDACs)是真核細(xì)胞中的一類重要蛋白酶,參與染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)修飾和基因表達(dá)調(diào)控,在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用[1]。通過(guò)組蛋白去乙酰化酶抑制劑(his-tone de

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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10 王洪;王友華;曹毅;劉t，

本文編號(hào)：764688