本文關(guān)鍵詞：融合蛋白IVT表達(dá)純化及生物學(xué)活性檢測(cè)

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【摘要】：目的克隆、表達(dá)和純化融合蛋白IVT,并檢測(cè)其生物學(xué)活性。方法采用基因工程手段將具有免疫功能、抗血管生成功能和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡功能的3個(gè)基因片段進(jìn)行融合構(gòu)建了融合基因IVT。將其插入pPIC9表達(dá)質(zhì)粒中,轉(zhuǎn)化至畢赤酵母GS115(his4),篩選出的表達(dá)株經(jīng)甲醇誘導(dǎo),表達(dá)了重組融合蛋白IVT,并得以純化。采用MTT法觀察IVT對(duì)CTLL-2細(xì)胞、HUVEC和NCI-H446細(xì)胞增殖的影響;通過Transwell實(shí)驗(yàn)觀察IVT對(duì)HUVEC遷移的影響;采用Hoechst染色檢測(cè)IVT對(duì)NCIH446細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果 IVT能促進(jìn)CTLL-2細(xì)胞增殖、抑制HUVEC和NCI-H446細(xì)胞生長(zhǎng)、降低HUVEC細(xì)胞遷移能力以及誘導(dǎo)NCI-H446細(xì)胞凋亡。結(jié)論 IVT具有多種生物學(xué)活性,為開發(fā)多功能的新型融合蛋白打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院;華僑大學(xué)分子藥物教育部工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 免疫 抗血管生成 凋亡 融合蛋白IVT 增殖
【基金】：福建省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2010J01207) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)資助項(xiàng)目(JB-ZR1142)
【分類號(hào)】：R341
【正文快照】： 白細(xì)胞介素2(interleukin-2,IL-2)由Morgan等[1]在1976年發(fā)現(xiàn),是一種由激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,其主要生物學(xué)效應(yīng)是增強(qiáng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答和NK細(xì)胞的免疫應(yīng)答,如抗腫瘤作用[1-4]。近年來(lái)研究結(jié)果顯示,IL-2 N端30個(gè)氨基酸殘基[IL-2(1-30)]構(gòu)成的螺旋A可以代替IL-2的

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本文編號(hào)：754810