本文關(guān)鍵詞：MicroRNA-34a調(diào)控細(xì)胞衰老的研究

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【摘要】：目的探討微RNA-34a(miRNA-34a)對細(xì)胞通過調(diào)控沉默交配型信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1(SIRT1)的表達(dá),從而引起細(xì)胞衰老的作用。方法構(gòu)建pre-miRNA-34a表達(dá)載體,并將其和一個(gè)不針對任何基因的微小RNA-1792(miRNA-1792)表達(dá)載體(其他實(shí)驗(yàn)室贈(zèng)送)分別轉(zhuǎn)染至HEK293和HUVEC細(xì)胞內(nèi),用RT-PCR、Western blot檢測各細(xì)胞組SIRT1mRNA與蛋白表達(dá)水平,以未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞為對照;將HUVEC細(xì)胞分為轉(zhuǎn)染不同質(zhì)粒、未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒和用SIRT1激活劑白藜蘆醇(終濃度1μmol/L,作用2h)處理HUVEC細(xì)胞(HUVEC-Res)組,中性彗星電泳分析H2O2作用2h后4組HUVEC細(xì)胞的雙鏈損傷情況;用阿霉素處理上述4組HUVEC細(xì)胞2h,β-半乳糖甘酶(SA-β-gal)染色檢測各細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)的衰老情況。結(jié)果測序結(jié)果表明pre-miRNA-34a表達(dá)載體構(gòu)建成功;RT-PCR、Western blot顯示HEK293-pre-miRNA-34a和HUVEC-pre-miRNA-34a中SIRT1mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的水平明顯下降(P0.001);中性彗星電泳檢測發(fā)現(xiàn)經(jīng)H2O2處理后,HUVEC-Res組DNA損傷最輕,而HUVEC-miRNA-34a組DNA損傷程度最為嚴(yán)重;SA-β-gal染色顯示DNA損傷后HUVEC-miRNA-34a衰老程度較其它3組嚴(yán)重,而HUVEC-Res組的衰老程度最為輕微。結(jié)論 miRNA-34a通過抑制SIRT1表達(dá)調(diào)控細(xì)胞衰老。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： miRNA-a SIRT 細(xì)胞衰老 DNA損傷
【基金】：教育部博士點(diǎn)基金新教師項(xiàng)目(No.20070610124) 教育部留學(xué)回國人員啟動(dòng)基金項(xiàng)目(No.2008890-19-11)資助
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 微RNA(microRNA,miRNA)是近幾年繼小分子干擾(siRNA)之后非編碼RNA研究的又一熱點(diǎn)。miRNA是一類長度約為20～25nt的單鏈小分子RNA(少數(shù)小于20nt),通過與靶mRNA的特異性結(jié)合,在轉(zhuǎn)錄后水平上對基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。越來越多研究表明miRNA參與細(xì)胞衰老進(jìn)程[1,2]。miRNA微陣列結(jié)果

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高學(xué)軍,蔡霞,張鵬,唐勝建,楊彪炳,牟少春,鞠曉燕;成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中β-半乳糖苷酶的變化[J];濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年02期

2 賀福初;;衰老分子生物學(xué)巡禮——1989年洛杉磯討論會(huì)概要[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1990年01期

3 陳方;武棟成;;細(xì)胞衰老機(jī)制的新進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).老年醫(yī)學(xué)分冊;1997年01期

4 黃丹;細(xì)胞衰老的研究進(jìn)展(綜述)[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2001年06期

5 李文瑞;劉新光;周中軍;;DNA損傷與細(xì)胞衰老關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

6 萬建，

本文編號(hào)：753221