本文關鍵詞：艾灸對AD模型大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡的影響

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【摘要】：目的通過艾灸干預阿爾茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠,觀察艾灸干預對AD模型大鼠學習記憶能力,大腦海馬區(qū)凋亡相關基因B淋巴細胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相關蛋白X(Bcl-2 association x protein,Bax)表達的情況,以及海馬區(qū)β淀粉樣蛋白(amyloidβprotein,Aβ)42、白細胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)表達的情況,來探討艾灸對AD大鼠大腦海馬內神經(jīng)元細胞凋亡的調控作用,從而為艾灸治療AD提供進一步的理論支持。方法將60只2月齡SD雄性大鼠,SPF級,300g(±30),適應性喂養(yǎng)3d天后,按隨機數(shù)字表法分為空白組、假手術組、模型組、西藥組和艾灸組,每組12只。空白組常規(guī)喂養(yǎng)不做任何處置,假手術組雙側側腦室注射檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液,其余各組則采用雙側側腦室注射STZ構建AD模型。造模完成后對大鼠再次進行Morris水迷宮篩選,與造模前相比,平均逃避潛伏期延長、穿越平臺次數(shù)下降為造模成功,并除去死亡大鼠2只,最后納入實驗的大鼠為空白組12只、假手術組12只、模型組11只、西藥組11只、艾灸組12只。艾灸組取“百會”、“長強”、“關元”、“命門”,懸灸距皮膚3cm,長強、命門、關元各10min,百會3min,隔2d灸,10次/療程,共30d;西藥對照組給予鹽酸多奈哌齊混懸液進行灌胃,其中鹽酸多奈哌齊按0.45mg/kg計算用藥量,每日1次,每次灌胃不超過3ml,共30次;空白組、假手術組、模型組不處理。干預結束后,采用Morris水迷宮檢測各組大鼠學習記憶能力的變化;采用免疫組化法檢測各組大鼠腦內Aβ42的表達;采用Western Blot檢測大腦海馬組織中凋亡相關蛋白Bcl-2和Bax表達的情況;采用雙抗體夾心法(ELISA)檢測IL-1β在各組大鼠海馬區(qū)的表達。結果一、Morris水迷宮檢測結果與假手術組比較,空白組大鼠的水迷宮結果無顯著差異(P0.05),模型組大鼠平均潛伏期明顯延長,平均穿越平臺的次數(shù)明顯下降(P0.05);與模型組比較,西藥組和艾灸組大鼠平均潛伏期明顯縮短,平均穿越平臺的次數(shù)明顯增加(P0.05);而西藥組與艾灸組之間無差異(P0.05)。二、免疫組化檢測結果與假手術組比較,空白組大鼠海馬區(qū)Aβ42、Bcl-2的陽性表達無顯著差異(P0.05),模型組大鼠海馬區(qū)Aβ42的陽性表達增加(P0.05);與模型組比較,西藥組和艾灸組大鼠海馬區(qū)Aβ42的陽性表達減少(P0.05);而與西藥組對比,艾灸組大鼠海馬區(qū)Aβ42的陽性減少(P0.05)。三、Western Blot的檢測結果空白組與假手術組大腦海馬組織中凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax的表達無顯著性差異(P0.05);模型組的Bcl-2相對表達量低于假手術組(P0.05),Bax的相對表達量高于假手術組(P0.05);西藥組和艾灸組Bcl-2的相對表達量高于模型組(P0.05),Bax的相對表達量高低模型組(P0.05);艾灸組Bcl-2的表達量高于西藥組,Bax的相對表達量低于西藥組(P0.05)。四、雙抗體夾心法的檢測結果空白組與假手術組大鼠海馬區(qū)IL-1β的表達無顯著性差異(P0.05);與假手術組相比,模型組的IL-1β的相對表達量升高(P0.05);與模型組相比,西藥組與艾灸組IL-1β的相對表達量降低(P0.05);而艾灸組與西藥組相比IL-1β的表達減少(P0.05)。結論以側腦室注射STZ方法造模,可以使AD模型大鼠的學習記憶能力減退,Aβ42沉積,炎癥因子(IL-1β)表達增加,促凋亡蛋白Bax表達升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表達下降,神經(jīng)元細胞凋亡。西藥鹽酸多奈哌齊和艾灸對AD模型大鼠具有治療作用,均能改善AD模型大鼠學習記憶能力,減少海馬區(qū)Aβ的異常沉積、IL-1β炎癥因子和Bax蛋白的表達,以及增加Bcl-2的表達,促進海馬區(qū)神經(jīng)元的再生,但艾灸的效果要優(yōu)于鹽酸多奈哌齊。艾灸干預能提高AD大鼠的學習記憶能力,其機制可能是調節(jié)了Aβ沉積導致的細胞凋亡的發(fā)生,進而保護海馬區(qū)神經(jīng)元。
【關鍵詞】：阿爾茨海默病 艾灸 鏈脲佐菌素 Aβ42 白介素1β B淋巴細胞瘤-2基因 Bcl-2相關蛋白X
【學位授予單位】：錦州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R245;R-332
【目錄】：

• 中文論著摘要4-7
• 英文論著摘要7-10
• 英文縮略語表10-11
• 前言11-14
• 實驗材料與方法14-27
• 結果27-32
• 討論32-39
• 結論39-40
• 本研究創(chuàng)新性的自我評價40-41
• 參考文獻41-49
• 附錄49-62
• 一、文獻綜述 神經(jīng)元凋亡在阿爾茨海默病發(fā)病機制中的作用49-58
• 參考文獻54-58
• 二、在學期間科研成績58-59
• 三、致謝59-60
• 四、個人簡介60-61
• 附圖61-62

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本文編號：749596