發(fā)布時間：2017-08-25 14:14

  本文關鍵詞：胚胎肝細胞提取液體外誘導骨髓干細胞向肝系細胞分化的實驗研究

  更多相關文章： 終末期肝病 胚胎肝細胞提取液 骨髓干細胞 肝干細胞 肝細胞 分化

【摘要】：目的探討胚胎肝細胞提取液體外誘導骨髓干細胞向肝系細胞分化的可行性。方法通過密度梯度分離法分離出骨髓中單個核細胞,進行體外培養(yǎng)和鑒定。在BMSCs傳代培養(yǎng)7d后,把培養(yǎng)細胞分為誘導組和非誘導組;誘導組加入胚胎肝細胞提取液的培養(yǎng)體系,非誘導組加入不含胚胎肝細胞提取液的基礎培養(yǎng)體系。在誘導培養(yǎng)d0,d10,d20,d30,d40對誘導分化的細胞進行形態(tài)學觀察、肝系細胞特異性標志物的鑒定。結(jié)果①形態(tài)學:誘導培養(yǎng)2周后,長梭形細胞大多數(shù)轉(zhuǎn)變成圓形、卵圓形及多角形,細胞呈肝干細胞樣圓形。②免疫細胞化學檢測:誘導培養(yǎng)d10～20細胞表達AFP、CKl9逐漸增強,d30~40逐漸減弱;誘導培養(yǎng)d10~40細胞表達ALB呈上升趨勢;陽性染色細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。非誘導組細胞不表達AFP、CKl9、ALB3種蛋白,為陰性染色。③糖原染色:誘導培養(yǎng)的細胞d10~40BMSCs均有糖原表達,非誘導細胞未見糖原表達(P㩳0.05)。結(jié)論胚胎肝細胞提取液在體外可以誘導骨髓干細胞向肝系細胞分化,并分化為具有合成、代謝、分泌及儲存功能的肝系細胞。
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學院附屬人民醫(yī)院;
【關鍵詞】： 終末期肝病 胚胎肝細胞提取液 骨髓干細胞 肝干細胞 肝細胞 分化
【基金】：2009年十堰市科學技術研究與開發(fā)計劃項目(SYKJ20090001)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 肝硬化、肝癌等肝臟疾病的治療是一個世界性難題。經(jīng)過研究,肝細胞移植,已成為一種治療急慢性肝功能衰竭和肝臟相關遺傳代謝疾病的方法。1999年Petersen等研究發(fā)現(xiàn)肝干細胞可來源于骨髓干細胞(bone marrow stem cells,BMSCs),骨髓源干細胞可以橫向分化為肝干細胞及肝細胞。然

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 蔡俊鷹;王教學;;肝干細胞移植治療終末期肝病的研究進展[J];安徽醫(yī)學;2009年11期

2 閆冬梅;徐開林;杜冰;鹿群先;曾令宇;;人骨髓基質(zhì)細胞的培養(yǎng)及鑒定[J];臨床血液學雜志;2009年02期

3 孫自勤;郭靈芝;汪偉業(yè);肖瑞明;;胎肝胞質(zhì)液治療急性肝衰竭實驗研究[J];新消化病學雜志;1993年04期

4 黃濤;徐如祥;姜曉丹;韓富;張志強;謝才軍;杜謀選;鄒雨汐;;大鼠骨髓基質(zhì)細胞的培養(yǎng)及其表面抗原的檢測[J];中國臨床解剖學雜志;2008年02期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李俊峰;體外誘導大鼠骨髓干細胞轉(zhuǎn)化為肝干細胞特征的研究[D];安徽醫(yī)科大學;2008年

2 胡晶;體外誘導大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝細胞樣細胞方向分化的初步研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 黃濤;孟志斌;賈丙申;李俊;王挺銳;譚海濤;王晟;;全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)rBMSCs及成骨誘導探討[J];廣東醫(yī)學;2010年09期

2 郝洪波;任思坡;謝曉東;;密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞方法的優(yōu)化[J];吉林醫(yī)學;2012年35期

3 王君;張振;張玉明;呂苗苗;肖志斌;高昌俊;孫緒德;;大鼠低氧誘導因子-1α基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞的實驗研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2010年20期

4 馬艷;陳雙;畢曉娟;江明;;羥乙基淀粉一步與兩步法分離骨髓單個核細胞及血小板的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復;2010年40期

5 楊曉明;賀福初;;肝細胞生成素的研究[J];世界華人消化雜志;2000年07期

6 于聰慧;冷希圣;魏玉華;劉繼超;杜如昱;;微囊內(nèi)殘余海藻酸鈉對微囊化大鼠肝細胞功能的影響[J];世界華人消化雜志;2000年09期

7 劉坤;羅軍;婁繁;馬艷;;大鼠骨髓基質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)和鑒定[J];中國普外基礎與臨床雜志;2009年11期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 謝福平;辛伐他汀干預骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細胞后microRNA的差異表達研究[D];福建醫(yī)科大學;2011年

2 范敬靜;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝樣細胞誘導分化及對急性肝衰竭的治療作用[D];福建醫(yī)科大學;2011年

3 婁繁;骨髓間充質(zhì)干細胞對大鼠急性放射性肝損傷修復的實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學;2009年

4 韓國勝;重組瘦素基因?qū)撬杌|(zhì)細胞增殖分化的影響[D];蘇州大學;2009年

5 劉坤;同種異體骨髓基質(zhì)細胞移植治療大鼠肢體缺血的實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學;2010年

6 宋浩;骨髓間充質(zhì)干細胞對大鼠肝癌變過程血管形成的影響[D];新疆醫(yī)科大學;2012年

7 楊陸蒙;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)方法的比較及細胞鑒定[D];新疆醫(yī)科大學;2012年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁軍,徐如祥,姜曉丹,黃濤,蔡穎謙,鄒雨汐,杜謀選;體外誘導骨髓基質(zhì)細胞向神經(jīng)細胞分化的形態(tài)學觀察[J];第四軍醫(yī)大學學報;2005年11期

2 王先寶;蔡德鴻;張樺;楊建明;孫嘉;張振;馬昭杰;陳宏;;磁標記豬骨髓間充質(zhì)干細胞肝臟移植示蹤研究[J];廣東醫(yī)學;2009年03期

3 頡玉欣,張進貴,郭曉華,趙萌,李宗鋒;體外分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞方法研究[J];河北醫(yī)科大學學報;2004年03期

4 梁峰;王韞芳;岳慧敏;南雪;施雙雙;閆舫;李榮;裴雪濤;;體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞定向肝細胞分化[J];軍醫(yī)進修學院學報;2006年03期

5 賽音其木格,侯相麟,趙麗,李寧;成人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為成骨細胞的研究[J];臨床血液學雜志;2005年04期

6 張金卷,杜智,李濤,朱爭艷,王毅軍,聶福華,宋繼昌;大鼠肝卵圓細胞的誘導、分離及鑒定[J];生物醫(yī)學工程與臨床;2004年04期

7 張怡,趙連三,唐紅;小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離與培養(yǎng)[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2004年05期

8 杜智;張金卷;李濤;朱爭艷;高英堂;王毅軍;聶福華;宋繼昌;;人胎兒肝干細胞異種移植治療小鼠暴發(fā)性肝功能衰竭[J];天津醫(yī)藥;2006年03期

9 姚鵬;胡大榮;王帥;胡學玲;聞煒;周一鳴;龔麗娟;;自體骨髓干細胞移植治療慢性重癥肝病臨床研究[J];透析與人工器官;2006年01期

10 李文晰,段芳齡,馬軍,朱武凌,高天慧,陳香宇,顏伏歸,李蔚,韓娜,王曉,孫艷,孫嫣;人骨髓單個核細胞向肝細胞誘導分化的體外研究[J];胃腸病學和肝病學雜志;2003年02期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于冰,姜海行;骨髓源性肝干細胞研究進展[J];廣西醫(yī)學;2005年03期

2 鄒清雁,張宜俊,孔祥平,張淑蓮,鄭曲波,肖榮,羅峰;大鼠肝干細胞的分離培養(yǎng)[J];實用肝臟病雜志;2000年04期

3 蔣吉英,李愛冬,周鴻鷹,梅妍,楊淑霞,洪華容,宋紅瑞,羊惠君;第3～5周人胚肝的細胞特征和生長因子及受體表達的研究[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2004年06期

4 蘇娟,朱海英,李文林,姚玉成,劉紅,王新民,胡以平,余宏宇;成體小鼠肝干細胞的長期體外培養(yǎng)和體內(nèi)分化研究[J];第二軍醫(yī)大學學報;2002年11期

5 廖彩仙;骨髓型肝干細胞[J];中華肝膽外科雜志;2003年06期

6 車媛梅,張一;肝干細胞[J];江西醫(yī)學檢驗;2004年05期

7 胡國信,張吉翔,劉晶美;干細胞和肝干細胞研究進展[J];實用臨床醫(yī)學;2002年05期

8 張淑蓮,曾平魯,肖榮,孔祥平,張宜俊,鄒清雁;肝干細胞分離培養(yǎng)條件的篩選[J];肝臟;2003年01期

9 張金卷 ,杜智 ,李濤 ,朱爭艷 ,王毅軍 ,聶福華 ,宋繼昌;人胎兒肝干細胞的分離及鑒定[J];天津醫(yī)藥;2005年05期

10 何祖平,張好建,汪蘊,王建今,豐美福;肝干細胞的可塑性和分化機理的研究進展[J];生物化學與生物物理進展;2003年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 賈曉花;程兆康;劉義;歐來良;孔德領;;白介素刺激骨髓間充質(zhì)干細胞提高CXCX4表達和增強細胞歸巢[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2008年年會暨首屆生物醫(yī)學工程與臨床論壇論文集[C];2008年

2 朱楚洪;應大君;張偉;董世武;魏勇;;骨髓干細胞誘導分化成內(nèi)皮細胞的實驗研究[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

3 鄒惟瑩;楊蓓;吳磊;張大雷;熊明娣;陳婷;陳加祥;鄒挺;;大鼠骨髓干細胞表達PTH初探[A];中國生理學會第九屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2011年

4 展玉濤;劉賓;陳紅松;叢旭;費然;魏來;王宇;;大鼠骨髓干細胞向肝細胞分化的研究[A];第一屆全國人工肝及血液凈化學術年會暨全國人工肝及血液凈化攻關協(xié)作組成立大會論文集[C];2004年

5 倪秀麗;楊蓓;吳磊;張大雷;盧夏英;熊明娣;鄒惟瑩;鄒挺;;雌性大鼠骨髓干細胞表達LHR和FSHR的研究[A];中國生理學會第23屆全國會員代表大會暨生理學學術大會論文摘要文集[C];2010年

6 劉曉蓉;張成;王訓;張為西;王展航;蘇全喜;盧錫林;;利用外周血象觀察骨髓干細胞移植后mdx鼠的骨髓重建過程[A];中華醫(yī)學會第七次全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編[C];2004年

7 王恒湘;;骨髓干細胞的臨床試驗研究[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

8 鞠振宇;;端粒與成體干細胞衰老[A];2008年全國抗衰老與老年癡呆學術會議論文集[C];2008年

9 張金卷;杜智;朱爭艷;李濤;;大鼠小肝干細胞分離[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第29屆學術年會暨首屆生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2009年

10 楊蓓;鄒挺;米美玲;秦海燕;周玲;王晶磊;徐斯凡;;支持細胞誘導骨髓干細胞向精原細胞分化的研究[A];中國生理學會2007年消化內(nèi)分泌生殖學術研討會論文摘要匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 王丹;植入骨髓干細胞助外來心臟獲“認可”[N];健康報;2010年

2 華聞;骨髓干細胞不能直接修復受損心肌？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

3 張?zhí)旎?骨髓干細胞不能直接修復受損心肌[N];中國醫(yī)藥報;2004年

4 廣聞;骨髓干細胞治療多種眼疾[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2002年

5 記者 吳偉農(nóng);美用骨髓干細胞培養(yǎng)出神經(jīng)細胞[N];新華每日電訊;2000年

6 記者 董映璧;骨髓干細胞治愈癲癇頑癥[N];科技日報;2003年

7 記者 毛磊;骨髓干細胞或可治心臟[N];新華每日電訊;2002年

8 新華社記者 潘治;骨髓干細胞修復受損心臟[N];新華每日電訊;2003年

9 記者 王艷紅;成年人骨髓干細胞培育出肝細胞[N];新華每日電訊;2000年

10 張梅珍 記者 蔣寒;國內(nèi)首次骨髓干細胞移植肝臟成功[N];科技日報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余宏宇;小鼠肝干細胞存在的病理學依據(jù)及其在肝再生中的作用[D];第二軍醫(yī)大學;2004年

2 蘇娟;人肝源性干細胞系的建立及其生物學特性研究[D];第二軍醫(yī)大學;2004年

3 周播江;肝大部切除鼠血清誘導骨髓干細胞向肝前體細胞的分化及其基因表達譜的變化[D];復旦大學;2005年

4 單云峰;大鼠肝卵圓細胞活化、分離、培養(yǎng)和鑒定及P28～（GANK）在肝卵圓細胞活化和增殖中作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2005年

5 蔣吉英;胚胎肝干細胞的增殖、分化及其調(diào)控因素[D];四川大學;2004年

6 呂曉輝;STAT3及SOCS3信號分子在肝前體細胞增殖分化過程中的作用[D];中國醫(yī)科大學;2007年

7 楊應斌;人骨髓干細胞源性惡性轉(zhuǎn)化細胞的靶向清除[D];重慶大學;2010年

8 高沿航;人胎兒肝臟干細胞體外分離培養(yǎng)及增殖分化機制研究[D];吉林大學;2007年

9 周軍年;肝/造血共祖細胞的鑒定及Epimorphin調(diào)控肝干細胞分化的機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2009年

10 賈雅麗;Epimorphin在正常與異常肝細胞發(fā)育中的作用及其調(diào)控機制的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 洪國慶;肝干細胞在肝臟疾病中應用的研究進展[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

2 高文婷;下丘腦垂體腎上腺軸反應對骨髓干細胞的動員作用與分子機制[D];第三軍醫(yī)大學;2012年

3 于冰;體外誘導大鼠骨髓干細胞分化為肝樣細胞的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學;2005年

4 高植泉;體外不同誘導條件對大鼠胚胎肝干細胞分化影響的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

5 蘇娟;小鼠肝干細胞的分離培養(yǎng)及其生物學特性研究[D];第二軍醫(yī)大學;2001年

6 孫曉艷;肝干細胞誘導分化為胰島素分泌細胞的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

7 盧夏英;雌性大鼠骨髓干細胞離體從頭合成雌二醇的研究[D];南昌大學;2010年

8 陳焱;人胚胎骨髓間充質(zhì)干細胞在大鼠體內(nèi)分化為肝細胞的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

9 趙戈;不同干預條件對大鼠胚胎肝干細胞體外培養(yǎng)影響的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

10 張偉;體外誘導大鼠骨髓干細胞分化為胰島素分泌細胞[D];大連醫(yī)科大學;2007年

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