本文關鍵詞：H7N9亞型禽流感病毒非結構蛋白-1真核表達載體的構建與表達

  更多相關文章： HN亞型禽流感病毒 NS 真核表達 免疫印跡

【摘要】：目的:構建甲型H7N9亞型禽流感病毒非結構蛋白NS1真核表達載體并轉染293T細胞以表達其編碼的蛋白。方法:從南京分離株H7N9流感病毒[A/Nanjing/1/2013(H7N9)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技術擴增NS1全長基因,將其克隆至pMD18-T載體中構建pMD18-T-NS1質粒,以pMD18-T-NS1質粒為模板擴增NS1基因。雙酶切NS1基因PCR產物與PXJ40-MYC后,連接構建真核表達載體PXJ40-MYC-NS1,經(jīng)酶切及測序鑒定后將質粒轉染到293T細胞中,通過Western blot鑒定NS1蛋白的表達。結果:經(jīng)雙酶切、測序鑒定證實NS1基因的真核表達載體構建成功。Western blot法可見NS1基因編碼蛋白的成功表達。結論:成功構建了H7N9非結構蛋白NS1真核表達載體,該表達載體的構建為后期建立穩(wěn)定表達NS1蛋白的細胞模型和NS1蛋白功能研究奠定基礎。
【作者單位】： 江蘇省疾病預防控制中心病原微生物研究所 衛(wèi)生部腸道病原微生物重點實驗室;
【關鍵詞】： HN亞型禽流感病毒 NS 真核表達 免疫印跡
【基金】：國家科技重大專項(2012ZX10004-210-004)
【分類號】：R373
【正文快照】： 禽流感(avian influenza,AI)是由禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的一種禽類感染和(或)疾病綜合征。根據(jù)AIV致病力的差異,將其分為高致病性禽流感(highly pathogenic avian influen-za,HPAIV,如H5N1)和低致病性禽流感(lowpathogenic avian influenza,LPAIV,如H9N2)

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張長輝;亓文寶;田進;李華楠;黃麗紅;焦培榮;徐成剛;廖明;;一株H4N6亞型禽流感病毒A/duck/Guangdong/W8/2011(H4N6)的全基因組測序及遺傳進化分析[J];中國獸醫(yī)科學;2013年09期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 程凱慧;H6N1亞型禽流感對哺乳動物的傳播與致病機制研究[D];石河子大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊婧;H9亞型禽流感病毒遺傳演化分析及致病性研究與疫苗免疫效果評估[D];中國農業(yè)科學院;2013年

2 郭捷;H1亞型禽流感病毒分離鑒定、遺傳進化分析及快速檢測方法的研究[D];廣西大學;2013年

3 孔暉暉;攜帶2009/H1N1病毒NS基因的H5N1病毒生物學特性研究[D];中國農業(yè)科學院;2013年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張文帥;卞倩;溫恬;遲瑩;李燕;焦永軍;;甲型H1N1流感病毒非結構蛋白NS1真核表達載體的構建與表達[J];細胞與分子免疫學雜志;2011年03期

2 沈嵐,李霞,張自峰,蘇金,劉新平,藥立波;人akt1基因真核表達載體的構建及表達[J];第四軍醫(yī)大學學報;2005年07期

3 劉斌波,李向群,曹曉春,劉君炎;Granulysin真核表達載體的構建與鑒定[J];武漢大學學報(醫(yī)學版);2005年06期

4 蔣永林;王靜;王鑫;余敏君;萬艷平;;人乳頭瘤病毒16型E6蛋白真核表達載體的構建及表達[J];南華大學學報(醫(yī)學版);2006年04期

5 顧海濤;陳榮華;郭錫熔;沈立;;小鼠GATA4基因真核表達載體的構建及其在P19細胞中的表達[J];南京醫(yī)科大學學報(自然科學版);2009年07期

6 馬本江,畢莉,潘尚哈,林春艷,孫蕾,常東,劉小民,鄧國華;中國人肥胖基因真核表達載體的構建[J];生物技術;1998年04期

7 范雄林,徐志凱,白光春,李元,李別虎,薛瑩;結核分枝桿菌Ag85B基因的克隆及真核表達載體的構建[J];細胞與分子免疫學雜志;2000年04期

8 湯黎明,趙勤,何煒,朱涵,王志舉,張文豪,趙國強,董子明;人CD154基因真核表達載體的構建及在Eca109細胞中的表達[J];鄭州大學學報(醫(yī)學版);2005年04期

9 董艷;張宏利;馮綺文;陳雪茹;蘇青;;人PCK1基因克隆及其表達載體的構建[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2006年02期

10 袁媛;何金生;張梅;宋蔚;李棟梁;虞結梅;楊兵;;人呼吸道合胞病毒F基因的克隆、真核表達與鑒定[J];免疫學雜志;2006年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹鄲丹;梁英民;韓驊;侯麗宏;王耀春;胡興斌;張萍;康志杰;時宏偉;;RBP-J與KyoT2真核表達載體的構建與鑒定[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

2 藺麗慧;崔玉寶;李莉;;Fcγ-Der f2載體構建及融合蛋白表達[A];中華醫(yī)學會第八次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中華醫(yī)學會檢驗分會成立30周年慶典大會資料匯編[C];2009年

3 魏中南;夏劍波;;乙型肝炎病毒前S2基因克隆及真核表達載體的構建[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

4 胡珍;饒賢才;陳志瑾;朱軍民;劉佳;王嘉麗;張俊磊;王冬梅;楊杰;原薇薇;;雙價D-J假病毒真核表達載體的構建[A];重慶微生物學會第九屆會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2009年

5 康艷梅;趙明秋;沈海燕;琚春梅;陳金頂;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒ORF5/6/7基因真核表達載體的構建[A];中國畜牧獸醫(yī)學會生物制品學分會中國微生物學會獸醫(yī)微生物學專業(yè)委員會2010年學術年會（第三屆中國獸藥大會學術論壇）論文集[C];2010年

6 李少麗;王昌慶;丁壯;叢彥龍;尹仁福;;NA-1株鵝源新城疫病毒全長cDNA的獲得[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十四次學術研討會論文集[C];2008年

7 王龍;胡s，

本文編號：714829