本文關(guān)鍵詞：1個新的白介素-32剪接異構(gòu)體的克隆與表達

  更多相關(guān)文章： 白介素- 剪接異構(gòu)體 原核表達 真核表達

【摘要】：目的對白介素-32(interleukin-32,IL-32)的不同剪接異構(gòu)體進行克隆及表達。方法設(shè)計保守引物,以Jurkat細胞的cDNA為模板進行PCR擴增,克隆IL-32不同剪接異構(gòu)體;DNA測序擴增產(chǎn)物,計算機輔助分析IL-32基因序列特征;構(gòu)建IL-32原核及真核表達重組質(zhì)粒,并利用SDS-PAGE和Western blot檢測其表達情況。結(jié)果克隆得到已知的IL-32的6個剪接異構(gòu)體(α、β、γ、δ、ε、ζ),還克隆得到1個新的IL-32剪接異構(gòu)體,將其命名為IL-32η,Genbank登錄號JN546102。IL-32η編碼區(qū)長度為336 bp,編碼的蛋白含111個氨基酸殘基,其理論相對分子質(zhì)量為12 560。IL-32η原核表達產(chǎn)物主要以可溶形式位于宿主菌的周質(zhì)腔。親和純化了重組IL-32η,利用重組IL-32η制備了兔多克隆抗體,該抗體能夠識別IL-32全部的7個剪接異構(gòu)體。結(jié)論克隆得到1個新的IL-32剪接異構(gòu)體IL-32η,它的發(fā)現(xiàn)將為全面理解IL-32的功能提供新思路。
【作者單位】： 南通大學醫(yī)學院病原生物學系;
【關(guān)鍵詞】： 白介素- 剪接異構(gòu)體 原核表達 真核表達
【基金】：江蘇省高校自然科學基金(11KJB310008) 南通市科技計劃項目(K2010035) 南通大學自然科學預研項目(10ZY009)
【分類號】：R346
【正文快照】： 白介素-32(interleukin-32,IL-32)是新近報道的促炎癥細胞因子,其主要來源是T淋巴細胞、NK細胞、單核細胞及上皮細胞等[1-2]。編碼IL-32的基因位于人染色體16p13.3,包括8個外顯子[3]。最初報道,IL-32有4種不同的剪接異構(gòu)體,包括IL-32α、IL-32β、IL-32γ、和IL-32δ[1]。此后

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