星形膠質(zhì)細(xì)胞影響神經(jīng)干細(xì)胞突觸表達(dá)的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)家族基因表達(dá)機(jī)制探討
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【摘要】:目的探討1甲基4苯基-吡啶離子(MPP+)和星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞突觸素和生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP 43)表達(dá)的影響,以及星形膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族基因表達(dá)變化,包括腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF),神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF),神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(NT 3)。方法實(shí)驗(yàn)分為兩步驟,第一步驟:PC12細(xì)胞分別經(jīng)MPP+誘導(dǎo)不同時(shí)間點(diǎn)(0 h、24 h、48 h、72 h、96 h)后分為兩部分,一部分應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)PC12細(xì)胞凋亡率;另一部分與星形膠質(zhì)細(xì)胞共育2 d,然后收集各組細(xì)胞和各組細(xì)胞條件培養(yǎng)液,應(yīng)用RT PCR檢測(cè)各組細(xì)胞BDNF mRNA、NGF mRNA和NT 3 mRNA表達(dá)變化;將各組細(xì)胞條件培養(yǎng)液對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)進(jìn)行誘導(dǎo)分化,免疫熒光檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)突觸素(SYN)和GAP 43表達(dá)。結(jié)果在MPP+作用48 h時(shí)間點(diǎn),PC12細(xì)胞凋亡率達(dá)高峰(P0.05);與各組比較,與MPP+誘導(dǎo)48 h后的PC12細(xì)胞共育48 h后的星形膠質(zhì)細(xì)胞(C3組)BDNF mRNA表達(dá)(A=93.96±4.89)明顯增高(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且C3組星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)突觸素(SYN)(A=34.09±2.69)、GAP 43(A=49.36±5.98)表達(dá)明顯升高,與其他組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);NGF mRNA與各組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);NT 3 mRNA在各組中均未見到表達(dá)。結(jié)論星形膠質(zhì)細(xì)胞與MPP+誘導(dǎo)凋亡的PC12細(xì)胞共育后,星形膠質(zhì)細(xì)胞BDNF基因表達(dá)明顯增高,星形膠質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)突觸素(SYN)和GAP 43表達(dá),BDNF可能參與了這一過程。
【作者單位】: 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 星形膠質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)干細(xì)胞 突觸素 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白- 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 神經(jīng)生長(zhǎng)因子 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-
【基金】:遼寧省教育廳高?蒲杏(jì)劃(2009A780) 遼寧省博士科研啟動(dòng)基金(20091106)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 近年來的國(guó)際研究顯示,神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstem cells,NSC)既能在體外增殖,又能保持未分化狀態(tài)。在誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)下,可分化為神經(jīng)樣細(xì)胞[1],其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如帕金森病(Parkinson disease,PD)的損傷修復(fù)中發(fā)揮重要作用,并且一直是此領(lǐng)域的研究前沿[2]。越來越多的研究證明
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,本文編號(hào):689696
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