本文關鍵詞：C2C12-GLUT4HA骨骼肌細胞株的篩選

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【摘要】：目的篩選過表達帶有HA表位的葡萄糖轉運子4(GLUT4HA)且具有收縮能力的C2C12骨骼肌細胞株。方法建立穩(wěn)定過表達GLUT4HA的C2C12骨骼肌細胞株,從中挑選出23個克隆。用光鏡觀察各個克隆分化為多核肌管的能力和響應電脈沖刺激(EPS)的收縮能力,并用免疫印跡法檢測各克隆中GLUT4HA蛋白的表達水平,篩選出分化良好、響應EPS收縮且高表達GLUT4HA的細胞株。將各細胞株進一步分為胰島素組及其對照組、EPS組及其對照組,用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定各組細胞膜上GLUT4HA的含量(轉位)。結果在選出的23個克隆中,克隆17的GLUT4HA表達量較高,分化和收縮能力良好,且在胰島素和EPS后GLUT4轉位顯著升高。結論本研究建立了過表達GLUT4HA的具有收縮能力的C2C12-GLUT4HA骨骼肌細胞株,可用于研究胰島素調節(jié)GLUT4轉位和收縮調節(jié)GLUT4轉位的機制。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學免疫教研室;天津中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 肌骨骼 葡萄糖轉運體型 細胞培養(yǎng)的 胰島素 肌收縮 電脈沖刺激
【基金】：國家自然科學基金資助項目(項目編號:81170740);國家自然科學基金委員會國際合作與交流項目(項目編號:81161120545)
【分類號】：R392
【正文快照】： 骨骼肌是攝取葡萄糖維持血糖穩(wěn)態(tài)的重要器官。胰島素和骨骼肌收縮均能促進葡萄糖轉運子4(GLUT4)從胞內囊泡轉運到胞膜上,增加葡萄糖攝取[1]。相比胰島素信號機制,人們對運動/肌肉收縮促進葡萄糖攝取的機制了解較少。體外骨骼肌細胞培養(yǎng)技術以其操作簡單、費用低廉、培養(yǎng)的細

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 于俊娜;牛文彥;;CaMKⅡ在收縮促進骨骼肌細胞GLUT4轉位中的作用[J];天津醫(yī)藥;2011年06期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李厚文;楊永瑾;;樹，

本文編號：683930