本文關(guān)鍵詞：C2C12-GLUT4HA骨骼肌細(xì)胞株的篩選

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【摘要】：目的篩選過表達(dá)帶有HA表位的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4(GLUT4HA)且具有收縮能力的C2C12骨骼肌細(xì)胞株。方法建立穩(wěn)定過表達(dá)GLUT4HA的C2C12骨骼肌細(xì)胞株,從中挑選出23個(gè)克隆。用光鏡觀察各個(gè)克隆分化為多核肌管的能力和響應(yīng)電脈沖刺激(EPS)的收縮能力,并用免疫印跡法檢測(cè)各克隆中GLUT4HA蛋白的表達(dá)水平,篩選出分化良好、響應(yīng)EPS收縮且高表達(dá)GLUT4HA的細(xì)胞株。將各細(xì)胞株進(jìn)一步分為胰島素組及其對(duì)照組、EPS組及其對(duì)照組,用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定各組細(xì)胞膜上GLUT4HA的含量(轉(zhuǎn)位)。結(jié)果在選出的23個(gè)克隆中,克隆17的GLUT4HA表達(dá)量較高,分化和收縮能力良好,且在胰島素和EPS后GLUT4轉(zhuǎn)位顯著升高。結(jié)論本研究建立了過表達(dá)GLUT4HA的具有收縮能力的C2C12-GLUT4HA骨骼肌細(xì)胞株,可用于研究胰島素調(diào)節(jié)GLUT4轉(zhuǎn)位和收縮調(diào)節(jié)GLUT4轉(zhuǎn)位的機(jī)制。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)免疫教研室;天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 肌骨骼 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體型 細(xì)胞培養(yǎng)的 胰島素 肌收縮 電脈沖刺激
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):81170740);國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)國(guó)際合作與交流項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):81161120545)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 骨骼肌是攝取葡萄糖維持血糖穩(wěn)態(tài)的重要器官。胰島素和骨骼肌收縮均能促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4(GLUT4)從胞內(nèi)囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到胞膜上,增加葡萄糖攝取[1]。相比胰島素信號(hào)機(jī)制,人們對(duì)運(yùn)動(dòng)/肌肉收縮促進(jìn)葡萄糖攝取的機(jī)制了解較少。體外骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以其操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低廉、培養(yǎng)的細(xì)

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 于俊娜;牛文彥;;CaMKⅡ在收縮促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞GLUT4轉(zhuǎn)位中的作用[J];天津醫(yī)藥;2011年06期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李厚文;楊永瑾;;樹，

本文編號(hào)：683930