本文關(guān)鍵詞：cPKCγ在HPC抗N2a細(xì)胞OGD損傷中作用及其分子機(jī)制

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【摘要】：目的在離體細(xì)胞水平,探討經(jīng)典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧預(yù)適應(yīng)(HPC)對抗小鼠成神經(jīng)瘤細(xì)胞(N2a)氧糖剝奪(OGD)損傷中作用及其可能的細(xì)胞分子機(jī)制。方法建立N2a細(xì)胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)比色法、乳酸脫氫酶(LDH)漏出率、原位末端標(biāo)記(TUNEL)和蛋白印跡(Western blot)幾種方法,分別檢測N2a細(xì)胞損傷、壞死、凋亡和自噬水平。結(jié)果 OGD 2和4 h可使N2a細(xì)胞的生存率顯著降低、死亡率明顯增高(P0.05,n=6);HPC(20 min)明顯改善OGD 3 h對N2a細(xì)胞的損傷作用,而cPKCγ抑制劑Go6983(6 nmol/L)則顯著解除HPC對OGD細(xì)胞的保護(hù)作用(P0.05,n=16);OGD 3 h明顯增加N2a細(xì)胞的凋亡數(shù)目(P0.05,n=6),但HPC和Go6983+HPC均不能明顯影響OGD細(xì)胞凋亡水平;OGD 3 h顯著提高N2a細(xì)胞的自噬水平,Go6983和HPC+Go6983均可明顯降低OGD細(xì)胞的自噬水平(P0.05,n=6),而HPC則對OGD細(xì)胞的自噬水平無明顯影響;HPC明顯改善OGD 3 h致N2a細(xì)胞壞死的程度,而Go6983則可解除HPC的保護(hù)作用(P0.05,n=16)。結(jié)論在離體細(xì)胞水平證實(shí)了cPKCγ在HPC改善N2a細(xì)胞OGD損傷中的作用,且這種作用主要與降低OGD細(xì)胞的壞死水平有關(guān)。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)系北京腦重大疾病研究院;
【關(guān)鍵詞】： 低氧預(yù)適應(yīng)(HPC) 氧糖剝奪(OGD) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞自噬 細(xì)胞壞死
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31071048,31171147) 國家重點(diǎn)基礎(chǔ)性研究項(xiàng)目(2012CB18200) 科技部973計(jì)劃前期研究專項(xiàng)(2011CB512109)
【分類號】：R363
【正文快照】： 國內(nèi)外研究數(shù)據(jù)顯示,血管相關(guān)性疾病位于國民死亡原因之首,其中腦卒中作為一種高致死、高致殘性疾病,給各國家庭和社會帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失和精神負(fù)擔(dān)[1-2]。然而,目前臨床對腦卒中的治療尚缺乏有效的治療措施[3-4]。缺血/低氧預(yù)適應(yīng)(I/HPC)可提高組織器官對繼發(fā)嚴(yán)重缺血/低

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本文編號：667773