本文關(guān)鍵詞：穩(wěn)定表達(dá)小鼠甘丙肽的N-2a細(xì)胞株的建立及內(nèi)源性過表達(dá)甘丙肽對N-2a細(xì)胞增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的建立穩(wěn)定表達(dá)小鼠甘丙肽(GAL)的N-2a細(xì)胞株GAL-N-2a,探討內(nèi)源性過表達(dá)的甘丙肽對N-2a細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法脂質(zhì)體法將重組載體PcDNA 3.1-PDGF-GAL轉(zhuǎn)染N-2a細(xì)胞,通過G418篩選獲得穩(wěn)定過表達(dá)GAL的細(xì)胞克隆,利用PCR、反轉(zhuǎn)錄PCR和Western blot法檢測細(xì)胞中GAL在N-2a細(xì)胞的過表達(dá),通過MTT法檢測N-2a細(xì)胞的增殖,借助流式細(xì)胞儀分別對過表達(dá)GAL的單克隆細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的檢測。結(jié)果穩(wěn)定轉(zhuǎn)染N-2a細(xì)胞即GAL-N-2a實現(xiàn)GAL基因的高表達(dá),MTT法繪制細(xì)胞生長曲線實驗顯示轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒PcDNA 3.1-PDGF-GAL的N-2a細(xì)胞增殖速度顯著低于對照組(P0.05),相比對照組未轉(zhuǎn)染正常細(xì)胞,內(nèi)源性過表達(dá)的GAL能使N-2a細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期而且對N-2a細(xì)胞凋亡有明顯的促進(jìn)作用。結(jié)論真核表達(dá)載體PcDNA 3.1-PDGF-GAL在轉(zhuǎn)染N-2a細(xì)胞中可高表達(dá)GAL蛋白,并對N-2a細(xì)胞的增殖和凋亡均有影響,為進(jìn)一步研究GAL的生物學(xué)作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心;
【關(guān)鍵詞】： N-a 甘丙肽 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【分類號】：R363
【正文快照】： 甘丙肽(galanin,GAL)是由29~30個氨基酸構(gòu)成的神經(jīng)肽,廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng),它參加攝食、學(xué)習(xí)記憶、痛覺和神經(jīng)性損傷、修復(fù)與退行性變等一系列生物活動,研究顯示甘丙肽通過3種與G蛋白相偶聯(lián)的受體(GalR1、GalR2、GalR3)調(diào)節(jié)一系列生物和行為學(xué)效應(yīng),在神經(jīng)元發(fā)生、發(fā)

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張銳虎;榮曼;劉田福;;Lipofectamine~(TM)2000轉(zhuǎn)染Neuro-2a細(xì)胞實驗條件的優(yōu)化[J];中國生物制品學(xué)雜志;2013年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 榮曼;pcDNA3.1-PDGF β -GAL在Neuro-2a細(xì)胞的表達(dá)及其對細(xì)胞增殖和周期的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 馬百超;張樹彪;王冰;崔韶暉;段艷;楊穎;;細(xì)胞種類對陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年14期

2 牛超;田代印;符州;王莉佳;張明香;;Lipofectamine~汶 LTX轉(zhuǎn)染Jurkat細(xì)胞條件的優(yōu)化[J];中國生物制品學(xué)雜志;2011年12期

3 段艷;王冰;崔韶輝;趙不凋;姜云霞;楊穎;姜慧明;張樹彪;;陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞的實驗[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年11期

4 段煉;周波;李啟富;;影響人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染pReceiver-M29-PRKCB1效率因素的探討[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張翠麗;富路;Levon M.Khachigian;;轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Ets-1在大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖與凋亡中的作用[J];中國病理生理雜志;2006年10期

2 劉彥;劉翠萍;張真穩(wěn);朱妍;劉超;;血管緊張素Ⅱ?qū)w外培養(yǎng)Ins-1細(xì)胞作用的研究[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2010年07期

3 楊梅;肖智林;呂青山;陳美芳;陳曉彬;謝秀梅;胡錦躍;;PolyI:C對人臍血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及功能的影響[J];中國動脈硬化雜志;2011年08期

4 徐軍;孫新;楊小迪;王媛媛;程啟媛;;弓形蟲感染小鼠血清對小鼠B16黑色素瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中國病原生物學(xué)雜志;2009年03期

5 李生偉;甘霖;王一如;劉長安;龔建平;李鉞;李友偉;;TIMP-3對內(nèi)皮細(xì)胞增殖抑制作用的研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年01期

6 吳德華;姜楨;郭克芳;陳瑞珍;;Apelin對肺血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和抗凋亡的作用[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年05期

7 申志新;高海玲;孫偉;;PCNA在大鼠腸缺血再灌注損傷中的表達(dá)及意義[J];中國科技信息;2010年18期

8 趙考考;崔毓桂;劉嘉茵;;熱休克蛋白10的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年01期

9 趙曉蓉;王敏;彭吉林;吳砂;趙曉平;黃韜;王國斌;伍鋼;沈關(guān)心;;EGF對一膜表面穩(wěn)定表達(dá)EGFR細(xì)胞系生物學(xué)特性的影響[J];廣東藥學(xué)院學(xué)報;2006年06期

10 胡靜;何小軍;馮永東;楊長永;韓中博;龔建平;;正常人外周血淋巴細(xì)胞凋亡受體的表達(dá)與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2007年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 卜友泉;丁嵩濤;魏麗麗;張琴;羅耀玲;易發(fā)平;宋方洲;;人hIL-24△103重組腺病毒的制備及其對A549細(xì)胞生長及凋亡的影響[A];第九屆西南三省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2008年

2 牛嗣云;高福祿;龐小靜;金曉娥;;細(xì)胞增殖與凋亡及EGF在人胎兒晶狀體發(fā)育中的變化[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

3 林玲;潘孔寒;;膿毒血癥患者外周血白細(xì)胞凋亡與病情及預(yù)后關(guān)系[A];2005年浙江省危重病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

4 陶霞;張樹輝;楚正緒;蘇定馮;;細(xì)胞凋亡參與去竇弓神經(jīng)大鼠的心肌損傷[A];中國藥理學(xué)會第八次全國代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

5 楊素榮;姚明輝;;細(xì)胞因子GM-CSF、IL-3和GM-CSF/IL-3融合蛋白對輻射致Tf-1細(xì)胞凋亡的影響[A];中國藥理學(xué)會第八次全國代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

6 祝成亮;魯敏翔;胡漢寧;劉芳;周新;;熱休克蛋白72重組腺病毒包裝及其對細(xì)胞凋亡的影響[A];第四屆全國血脂分析與臨床學(xué)術(shù)研討會暨第九屆全國脂蛋白學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

7 黃益玲;黃利鳴;張兆祥;尤程程;王洪武;魯華;蔣雪梅;;天花粉蛋白通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

8 宋衛(wèi)青;呂維紅;陳華波;;腫瘤壞死因子α致體外肝細(xì)胞凋亡效應(yīng)的研究[A];第四屆全國臨床檢驗學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

9 馮俊奇;李秀蘭;白人驍;;凋亡誘導(dǎo)因子與細(xì)胞凋亡(綜述)[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會2006年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2006年

10 梁鵬飛;黃曉元;蔣碧梅;張丕紅;楊興華;龍劍虹;;TNF-α誘導(dǎo)Hacat細(xì)胞凋亡的實驗研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張中橋;四軍醫(yī)大西京醫(yī)院研究證明：GS能誘導(dǎo)白血病K562細(xì)胞凋亡[N];中國醫(yī)藥報;2005年

2 李明輝;“細(xì)胞凋亡”治癌癥[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2002年

3 商東;“細(xì)胞凋亡”與臨床醫(yī)學(xué)[N];中國醫(yī)藥報;2001年

4 記者張建松;治療癌癥新途徑：細(xì)胞凋亡療法[N];科技日報;2002年

5 ;“細(xì)胞凋亡療法”正逐步成為治療癌癥的新途徑[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2002年

6 曉艷;金屬蛋白酶促使細(xì)胞凋亡[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2002年

7 勞英堅;揭示細(xì)胞凋亡的奧秘[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 新華社記者 姜巖 魏忠杰 錢錚;他們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡的奧秘[N];新華每日電訊;2002年

9 張?zhí)锟?細(xì)胞凋亡的意義[N];科技日報;2002年

10 張?zhí)锟?細(xì)胞凋亡的意義[N];文匯報;2002年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉光偉;低劑量電離輻射對小鼠睪丸生精細(xì)胞凋亡的影響及其基因調(diào)控[D];吉林大學(xué);2004年

2 劉正學(xué);SARS病毒特異性抗原抗體基因和N基因的研究[D];武漢大學(xué);2005年

3 韋莉莉;重組腺病毒突變型人低氧誘導(dǎo)因子1α調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

4 沈利;人類新基因BNIPL生物學(xué)功能的初步研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

5 郭敏;小鼠腎小體發(fā)生與發(fā)育的形態(tài)學(xué)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

6 崔培林;褪黑素對體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

7 陳金中;人類RBBP10和bima3的克隆和功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

8 趙曉蓉;穩(wěn)定表達(dá)EGFR細(xì)胞系的建立及其抗EGFR單鏈抗體的篩選與鑒定[D];華中科技大學(xué);2006年

9 李長菲;一種新型凋亡相關(guān)蛋白EAPF的克隆及功能研究[D];浙江大學(xué);2005年

10 朱明;GST-π基因表達(dá)及其調(diào)控的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1995年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李林;PDCD4及DDR2在Peroxynitrite誘導(dǎo)人中樞血管平滑肌細(xì)胞凋亡過程中表達(dá)的變化[D];山東大學(xué);2010年

2 陳愛灼;幽門螺桿菌組分對胃上皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2005年

3 張建軍;細(xì)胞凋亡在腸炎沙門氏菌致腸道屏障功能損傷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

4 白麗亞;大鼠全腦缺血再灌注損傷后調(diào)控基因Bcl-2、Bax的表達(dá)及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

5 章申峰;C-藻藍(lán)蛋白及其亞基的分離純化和體外抗腫瘤研究[D];浙江大學(xué);2005年

6 姚麗;兔抗人CIDE-3蛋白多克隆抗體的制備及應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 鄭敏;一氧化碳激活蛋白激酶R-樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶誘導(dǎo)血紅素氧化酶-1抑制內(nèi)皮細(xì)胞網(wǎng)應(yīng)激引起細(xì)胞凋亡的相關(guān)性研究[D];延邊大學(xué);2008年

8 鄧仲良;解脲脲原體LAMPs通過激活NF-κB誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)iNOS和凋亡[D];南華大學(xué);2005年

9 屈順林;NOX4在人血管細(xì)胞中的表達(dá)及其在內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用[D];南華大學(xué);2005年

10 孫維榮;血紅素加氧酶-1和細(xì)胞凋亡[D];吉林大學(xué);2004年

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