本文關鍵詞：慢病毒介導的敲低UBC9表達抑制ERβ類泛素化修飾水平

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【摘要】：目的建立穩(wěn)定敲低UBC9蛋白表達的293T細胞株,檢測其對雌激素受體β(ERβ)類泛素化修飾水平的調節(jié)作用。方法構建4條針對人UBC9基因的慢病毒短發(fā)夾RNA(shRNA)的干擾載體,將其與慢病毒包裝輔助質粒共轉染293T細胞后,收集病毒上清,感染293T細胞,經嘌呤霉素(puromycin)篩選后獲得穩(wěn)定表達慢病毒介導UBC9 shRNA的混合細胞集落,分別用實時(real-time)PCR和Western印跡方法檢測UBC9的表達情況,瞬時轉染方法檢測UBC9表達水平對ERβ類泛素化修飾水平的影響。結果建立了穩(wěn)定敲低UBC9的293T細胞株,UBC9降低能夠抑制ERβ類泛素化修飾水平。結論 UBC9在ERβ類泛素化修飾反應中發(fā)揮重要作用。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學科學院生物工程研究所;
【關鍵詞】： 慢病毒屬 UBC ERβ 類泛素化修飾 RNA干擾
【基金】：北京市自然科學基金資助項目(7112101) 國家973計劃資助項目(2011CB504200)
【分類號】：R373
【正文快照】： 雌激素受體(ER)屬于核受體超家族成員,為典型的配體(雌激素)依賴性轉錄因子。迄今共發(fā)現(xiàn)兩類ER:ERα和ERβ,它們?yōu)椴煌蚓幋a的產物,結構上高度同源。和ERα類似,ERβ與配體結合后可通過基因組模式以及快速的非基因組模式發(fā)揮作用[1,2]。ERα和ERβ有相同的也有各自特異的

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