本文關(guān)鍵詞：弓形蟲MIC2胞質(zhì)尾段蛋白及其多克隆抗體的制備

  更多相關(guān)文章： 剛地弓形蟲 微線體蛋白 胞質(zhì)尾 多克隆抗體

【摘要】：目的:制備弓形蟲微線體蛋白2胞質(zhì)尾段(MIC2C)蛋白片段及其多克隆抗體。方法:以弓形蟲cDNA文庫為模板,PCR擴(kuò)增135bp MIC2C基因片段,構(gòu)建MIC2C/pGEX-4T-1原核表達(dá)系統(tǒng);IPTG誘導(dǎo)表達(dá)GST-MIC2C融合蛋白;用純化的融合蛋白加免疫佐劑背部皮內(nèi)注射免疫新西蘭兔,制備多克隆抗體,親和層析純化并分析抗體的效價。結(jié)果:構(gòu)建了MIC2C原核表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)并純化了GST-MIC2C融合蛋白,蛋白的濃度為3.07mg/ml;獲得了抗該蛋白的兔源性抗血清,純化后的多克隆抗體效價為1:16 000。結(jié)論:在體外制備并純化了GST-MIC2C融合蛋白及其多克隆抗體,為后續(xù)弓形蟲入侵機(jī)制的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 剛地弓形蟲 微線體蛋白 胞質(zhì)尾 多克隆抗體
【基金】：河南省科技攻關(guān)計劃項目(112102310209) 河南省教育廳自然科學(xué)研究項目(2012B310019) 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院博士科研啟動基金(2010)資助
【分類號】：R382.5
【正文快照】： 弓形蟲(Toxoplasma gondii)是人獸共患弓形蟲病的病原體[1]。到目前為止,弓形蟲主動入侵宿主細(xì)胞的機(jī)制尚未完全闡明。已有研究表明微線體蛋白(microneme protein,MICs)在弓形蟲入侵過程中發(fā)揮重要作用[2]。為全面揭示弓形蟲的入侵機(jī)制,本研究制備MIC2胞質(zhì)尾(cytosolic tail d

【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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3 吳q;陳曉光;彭鴻娟;李華;;剛地弓形蟲SAG1基因的克隆及在大腸桿菌中的初步表達(dá)[A];中國動物學(xué)會第七屆全國青年寄生蟲學(xué)工作者學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2002年

4 吳偉;耿彬;王述Y，

本文編號：661972