本文關(guān)鍵詞：不同刺激因子對(duì)人CIK細(xì)胞功能影響

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【摘要】：本研究觀(guān)察不同的細(xì)胞刺激因子共刺激對(duì)人CIK細(xì)胞增殖和功能的影響。用淋巴細(xì)胞分離液分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNC),按常規(guī)方法從PBMNC培養(yǎng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK細(xì)胞),然后根據(jù)加入CD28 mAb、IL-15和IL-21將實(shí)驗(yàn)分為5組:對(duì)照組(CIK),CB28+IL-15+IL-21組,IL-15+IL-21組,CD28+IL-15組和CD28+IL-21組。用全自動(dòng)五分類(lèi)血液分析儀計(jì)數(shù)CIK細(xì)胞的增殖能力;用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞刺激因子誘導(dǎo)的CIK細(xì)胞的粒酶B(granzyme B),穿孔蛋白(perforin)和CD107α等分子的變化;用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α的含量;乳酸脫氫酶釋放法測(cè)定細(xì)胞刺激因子共刺激的細(xì)胞對(duì)人肺癌細(xì)胞株A549(A549)、乳腺癌細(xì)胞株MFC-7(MFC-7)和人黑素瘤細(xì)胞株HME1(HME1)的殺傷活性。結(jié)果表明,在CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入不同的刺激因子,細(xì)胞增殖能力有明顯的差異,以含CD28、IL-15和IL-21組細(xì)胞增殖倍數(shù)最高,在培養(yǎng)第10日時(shí)該組的增殖倍數(shù)為255.3±6.3,明顯高于對(duì)照組,IL-21+IL-15組和CD28+IL-21組細(xì)胞增殖倍數(shù)分別為166.6±13.5、199.4±15.0和228.8±16.6(P0.05),添加CD28和IL-15組則穿孔蛋白含量明顯高于其他組。所有共刺激組的穿孔蛋白、粒酶B和CD107a表達(dá)百分率均明顯高于對(duì)照組(P0.05)。對(duì)A549、MFC-7和HME1細(xì)胞殺傷活性以含CD28+IL-15組最高(82.2%、59.3%和70.6%),明顯高于對(duì)照組(60.9%、49.6%和48.4%)(P0.05)。在CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系中增加CD28+IL-15+IL-21組中細(xì)胞分泌IFN-γ量顯著高于其他各組(P0.05)。結(jié)論:不同刺激因子活化的CIK細(xì)胞的增殖能力、分泌細(xì)胞因子和殺傷活性有明顯差異,在培養(yǎng)體系中增加相應(yīng)的細(xì)胞刺激因子對(duì)細(xì)胞功能定向培養(yǎng)有一定意義。
【作者單位】： 中國(guó)人民解放軍第九七醫(yī)院腫瘤生物治療中心;
【關(guān)鍵詞】： 共刺激 CIK細(xì)胞 細(xì)胞因子 殺傷活性
【基金】：南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題(11MA040)
【分類(lèi)號(hào)】：R363
【正文快照】： 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine inducedkiller,CIK)又稱(chēng)自然殺傷細(xì)胞樣T淋巴細(xì)胞,具有T淋巴細(xì)胞特異性抗瘤活性,又有NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn),是一種新型、高效、廣譜的免疫活性細(xì)胞[1-4]。許多研究發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞中添加不同的刺激因子對(duì)其增殖和抗腫

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5 姜艷;人外周血未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞體外擴(kuò)增、鑒定及抗成熟特性的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 蒲仁芳;共刺激分子B7-H3與糖基化相關(guān)性的初步探討[D];蘇州大學(xué);2006年

7 張蕾;CIK細(xì)胞毒活性增強(qiáng)的機(jī)理及穿孔素N端肽段放射誘導(dǎo)表達(dá)研究[D];南京師范大學(xué);2008年

8 朱必清;CD137信號(hào)對(duì)CIK細(xì)胞增殖和功能調(diào)節(jié)的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

9 葉燕;TLR聯(lián)合激活的DC瘤苗的抗腫瘤作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2007年

10 李靖;RetroNectin對(duì)CIK細(xì)胞增殖、表型變化和殺傷活性影響的初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號(hào)：655038