本文關(guān)鍵詞：實時細胞監(jiān)測技術(shù)的人腸道病毒71型感染性檢測方法研究

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【摘要】：開展基于微電子傳感器技術(shù)的實時細胞監(jiān)測技術(shù)(Real-time Cell Assay,RTCA)在人腸道病毒71型(HEV71)病毒誘導(dǎo)的細胞病變檢測方法中的應(yīng)用價值研究。動態(tài)觀察RD細胞不同階段的生長指數(shù),選擇合適的細胞濃度開展HEV71病毒感染力和血清中HEV71中和抗體效價測定。同時應(yīng)用傳統(tǒng)的微量試驗作為方法學(xué)的比較和結(jié)果驗證。細胞阻抗通過軟件轉(zhuǎn)換成細胞指數(shù)CI值和可視的動態(tài)變化曲線顯示,在96電子孔板上,當(dāng)RD細胞濃度為1.5×104個/孔時能滿足HEV71病毒感染性檢測的觀察天數(shù)大于5d的要求。與傳統(tǒng)顯微鏡觀察細胞CPE的方法比較,兩種方法在接種病毒后的132h(約5.5d)產(chǎn)生病毒致細胞病變的終點判斷結(jié)果一致。在中和抗體試驗中,三份感染HEV71病毒的人血清中和抗體效價CI值結(jié)果和傳統(tǒng)的96孔微量板鏡檢法結(jié)果相符。實時細胞監(jiān)測技術(shù)可以提示研究者,即使是終點判斷結(jié)果為相同的中和抗體滴度的血清,其所含病毒誘導(dǎo)的細胞病變出現(xiàn)時間也可能有所不同。實時細胞監(jiān)測技術(shù)用于HEV71病毒感染力和血清中和抗體效價檢測與傳統(tǒng)的微量板法檢測相比可以節(jié)省勞力,消除人為判斷的誤差,可以作為傳統(tǒng)檢測方法的補充手段之一,也可以動態(tài)觀察細胞病變的發(fā)生和發(fā)展,為進一步深入研究病毒感染力強弱或血清抗體消長提供更為科學(xué)的數(shù)據(jù)。
【作者單位】： 上海市疾病預(yù)防控制中心微生物實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 實時細胞監(jiān)測技術(shù)(RTCA) 人腸道病毒型(HEV) 中和試驗(NT)
【基金】：“十二五”國家重大科技專項《上海市傳染病病原譜流行規(guī)律研究》(ZX1004-211) 上海市衛(wèi)生局重點學(xué)科《衛(wèi)生微生物學(xué)》(12GWZX0801)
【分類號】：R373.9
【正文快照】： 實時細胞監(jiān)測技術(shù)(Real-time cell assay,RT-CA),采用微電子傳感器技術(shù),將細胞阻抗通過軟件轉(zhuǎn)換成細胞指數(shù)和可視的動態(tài)變化曲線,在無需對細胞進行標(biāo)記的情況下實時地觀察細胞的生長、發(fā)展和凋亡,包括細胞數(shù)量,細胞粘附力,細胞活力以及非侵入性的分析細胞運動能力[1-2]。起初,，

本文編號：653871